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林木RNA干扰稳定表达试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.RNA干扰现象最早在（）中被发现？

A.线虫B.果蝇C.小鼠D.人

2.介导RNA干扰的关键小分子是（）

A.tRNAB.rRNAC.siRNAD.mRNA

3.以下哪项不是RNA干扰的特点（）

A.特异性B.高效性C.持久性D.随机性

4.在林木中进行RNA干扰稳定表达常用载体是（）

A.细菌质粒B.病毒载体C.Ti质粒D.噬菌体

5.RNA干扰作用于（）水平

A.DNA复制B.转录C.翻译D.蛋白质修饰

6.用于RNA干扰的双链RNA长度一般为（）bp

A.10-15B.21-23C.30-35D.40-45

7.以下哪种方法不能用于检测RNA干扰效果（）

A.WesternblotB.RT-PCRC.测序D.酶活性检测

8.稳定表达RNA干扰载体导入林木细胞常用方法是（）

A.电穿孔法B.基因枪法C.农杆菌介导法D.脂质体转染法

9.启动RNA干扰的双链RNA来源不包括（）

A.人工合成B.体内转录C.天然双链RNAD.蛋白质降解产物

10.RNA干扰能够沉默的基因是（）

A.特定基因B.所有基因C.随机基因D.抗性基因

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.RNA干扰在林木研究中的应用有（）

A.功能基因验证B.提高抗逆性C.改良品质D.调控生长发育

2.构建RNA干扰载体需要的元件有（）

A.启动子B.目的基因片段C.终止子D.筛选标记基因

3.影响RNA干扰效果的因素包括（）

A.双链RNA浓度B.作用时间C.细胞类型D.载体类型

4.检测RNA干扰对蛋白质表达影响的方法有（）

A.WesternblotB.ELISAC.免疫荧光D.双向电泳

5.下列属于RNA干扰相关蛋白的有（）

A.Dicer酶B.AGO蛋白C.RISC复合物D.DNA聚合酶

6.常用的林木遗传转化体系有（）

A.愈伤组织转化B.原生质体转化C.茎尖转化D.叶片转化

7.设计RNA干扰的双链RNA时要考虑（）

A.序列特异性B.GC含量C.避免重复序列D.与其他基因的同源性

8.RNA干扰与以下哪些生物学过程有关（）

A.抗病毒防御B.基因表达调控C.细胞分化D.染色体修饰

9.验证RNA干扰稳定表达的方法有（）

A.分子检测B.表型观察C.生理指标测定D.环境适应性评估

10.人工合成双链RNA的优点有（）

A.操作简便B.可精确设计C.产量高D.稳定性好

三、判断题（每题2分，共10题）

1.RNA干扰只能沉默外源基因。（）

2.只要导入双链RNA就能引发有效的RNA干扰。（）

3.农杆菌介导法适用于所有林木的RNA干扰稳定表达。（）

4.RNA干扰稳定表达株系的表型一定能稳定遗传。（）

5.不同林木对RNA干扰的敏感性相同。（）

6.双链RNA越短，RNA干扰效果越好。（）

7.检测RNA干扰只需检测基因转录水平变化。（）

8.构建RNA干扰载体不需要考虑载体的复制起点。（）

9.RNA干扰能够改变基因的DNA序列。（）

10.无筛选标记基因的载体无法用于RNA干扰稳定表达。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述RNA干扰的基本原理。

答案：外源双链RNA进入细胞后被Dicer酶切割成siRNA，siRNA与AGO等蛋白形成RISC复合物，RISC复合物识别并结合与siRNA互补的靶mRNA，从而降解靶mRNA，实现基因沉默。

2.构建RNA干扰载体的基本步骤有哪些？

答案：首先获取目的基因片段，将其反向重复序列连入载体，中间加入间隔序列；再选择合适启动子和终止子构建到载体上；最后加入筛选标记基因，经酶切、连接、转化等步骤完成载体构建。

3.举例说明RNA干扰在林木抗病虫害中的应用。

答案：比如针对某些害虫取食后激活的林木基因