视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的表达谱变化与靶基因预测研究.docxVIP

视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的表达谱变化与靶基因预测研究

一、引言

1.1研究背景与意义

视网膜神经节细胞（RetinalGanglionCells,RGCs）作为视觉传导通路的第一级神经元，在视觉信息的传递中起着关键作用，其轴突构成视神经，将视网膜的视觉信号传输至大脑。一旦RGCs受到损伤或发生死亡，会对视功能产生不可逆的损害，导致视力下降、视野缺损甚至失明。青光眼、糖尿病性视网膜病变和视神经萎缩等眼疾的主要病理特征之一便是RGCs的损伤或死亡。在放射治疗过程中，眼部不可避免地会受到一定剂量的辐射，从而引发视网膜神经节细胞放射损伤，这已成为影响放射治疗效果和患者生活质量的重要因素。据统计，在头颈部肿瘤放射治疗患者中，放射性视网膜病变的发生率可达10%-30%，严重者可导致失明，给患者带来沉重的身心负担和社会经济压力。

近年来，随着研究的不断深入，发现微小核糖核酸（microRNAs,miRNAs）参与了RGCs的发育、存活和功能维持，并在神经损伤后的疾病进展中发挥着重要作用。miRNAs是一类内源性非编码单链小分子RNA，长度约为22个核苷酸，主要通过与靶mRNA的3非编码区互补配对，抑制靶基因的翻译过程或促使靶mRNA降解，从而实现对基因表达的调控。在视网膜中，特定的miRNAs如miRNA-124，从RGCs发育早期就开始表达，并在成熟RGCs中维持高表达状态。研究表明，miRNA-124可通过抑制靶基因BACE1，减少淀粉样前体蛋白（Aβ）的产生，进而保护RGCs免受Aβ的神经毒性损害。

深入分析视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达，并进行靶基因预测，对于揭示放射损伤的分子机制、寻找潜在的治疗靶点以及开发新的治疗策略具有重要意义。这不仅有助于我们更好地理解眼疾的发病机制，为疾病的早期诊断和预防提供理论依据，还可能为临床治疗提供新的方向和方法，改善患者的预后，具有广阔的应用前景和社会价值。

1.2国内外研究现状

在视网膜神经节细胞放射损伤方面，国内外学者已进行了大量研究。放射性视网膜病变和放射性视盘病变的发病与放射治疗剂量密切相关，远程治疗中放射性视网膜病变发生的关键在于判断进入眼内的放射量，近程治疗脉络膜黑色素瘤和视网膜母细胞瘤时，局部视网膜和脉络膜的放射性改变较为普遍，且病变严重性与放射剂量相关。从接受放射治疗到出现视网膜病变的时间变异性较大，多数报告显示放射性视网膜病变出现在放射治疗后6个月-3年，放射性病变越严重潜伏期越短。视网膜血管内皮细胞首先遭受辐射损伤，其功能异常和细胞死亡是放射性视网膜病变的起始，随后引发一系列病理变化，如毛细血管闭锁、微动脉瘤形成、视网膜新生血管等。

关于miRNAs在视网膜神经节细胞中的研究，近年来也取得了显著进展。在视网膜中，已鉴定出多种与RGCs相关的miRNAs，它们在RGCs的发育、存活和功能维持中发挥着重要作用。在RGCs损伤后的修复和再生过程中，miRNAs同样扮演着关键角色。利用光损伤模型分析神经损伤后RGCs中miRNAs的差异表达，发现多个miRNAs的表达发生明显变化，如miRNA-21在神经损伤后的RGCs中显著上调，而miRNA-29b和-233则明显下调。通过对神经损伤后大鼠视神经的转录组分析，鉴定出一系列与RGCs再生相关的miRNAs，如miRNA-9、-146a、-182、-183、-212等。

目前已开发了多种方法和算法来预测miRNAs的靶基因，如miRanda、TargetScan、miRWalk等。这些预测工具依据miRNAs和mRNAs的序列信息，预测二者的互补配对关系，并计算靶基因得分，以筛选最可能的靶基因候选。

然而，当前研究仍存在一些不足与空白。对于视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的整体表达谱及动态变化规律，研究还不够全面和深入。在miRNAs靶基因的验证方面，虽然已有多种预测方法，但实验验证的工作仍有待加强，以明确miRNAs在放射损伤中的具体作用机制。此外，如何将miRNAs的研究成果转化为临床治疗手段，也是亟待解决的问题。

1.3研究目标与内容

本研究旨在通过深入探究视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达情况，并运用生物信息学方法进行靶基因预测，揭示miRNAs在视网膜神经节细胞放射损伤中的作用机制，为眼疾的防治提供新的理论依据和潜在治疗靶点。

具体研究内容包括：

建立视网膜神经节细胞放射损伤模型，采用合适的细胞系或动物模型，通过给予一定剂量的辐射，模拟视