血涂片制备染色和白细胞形态观察课件.pptVIP

根据不同的细胞种类及细胞的不同成分，对酸性及碱性染料的结合能力不同，而使各种细胞呈现出各自的特点。本实验使用吉姆萨染料：由天青(蓝)2号和酸性染料伊红混合配制而成。掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态原理目的

器材载玻片、推片、显微镜、微量吸管、移液枪试剂姬姆萨染色液、磷酸缓冲液、甲醇标本抗凝血注意：操作中请穿实验服并带一次性手套操作。

血涂片制备推片（夹角保持30°-45°）载玻片血液（10微升）将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B123

血涂片染色稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色15minPBS磷酸缓冲液漂洗（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥后即可镜检李四123涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min

血涂片的观察1.染色情况(满意、偏酸、偏碱）2.细胞分布情况

红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米

嗜中性：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米

嗜酸性：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10-15微米。

嗜碱性：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。

淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。

单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米

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