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林木原生质体分离纯化试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.分离林木原生质体常用的酶是（）

A.淀粉酶B.纤维素酶C.蛋白酶D.脂肪酶

答案：B

2.适合原生质体分离的材料通常是（）

A.老化叶片B.幼嫩组织C.木质化茎D.成熟果实

答案：B

3.原生质体分离时，酶液的渗透压一般（）细胞内渗透压。

A.低于B.高于C.等于D.无关

答案：C

4.分离原生质体时，常用的离心转速是（）

A.100r/minB.500r/minC.1500r/minD.3000r/min

答案：B

5.纯化原生质体常用的方法不包括（）

A.沉降法B.漂浮法C.密度梯度离心法D.电泳法

答案：D

6.原生质体分离过程中，一般需要添加（）来稳定其膜结构。

A.葡萄糖B.甘露醇C.蔗糖D.麦芽糖

答案：B

7.用于分离原生质体的材料需进行（）处理。

A.灭菌B.烘干C.冷冻D.水煮

答案：A

8.原生质体活力检测常用的染色剂是（）

A.甲基绿B.台盼蓝C.碘液D.刚果红

答案：B

9.提高原生质体产量的关键因素是（）

A.酶的种类B.酶解时间C.材料预处理D.以上都是

答案：D

10.原生质体的主要特点是（）

A.有细胞壁B.无细胞壁C.无细胞膜D.无细胞器

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响林木原生质体分离的因素有（）

A.材料基因型B.酶的种类C.酶解温度D.光照强度

答案：ABC

2.原生质体分离常用的酶包括（）

A.纤维素酶B.果胶酶C.半纤维素酶D.淀粉酶

答案：ABC

3.以下属于原生质体纯化方法的有（）

A.过滤离心法B.界面法C.荧光激活细胞分选法D.离心沉淀法

答案：ABC

4.检测原生质体活力的方法有（）

A.形态观察法B.荧光素双醋酸酯（FDA）染色法C.呼吸活性测定法D.台盼蓝染色法

答案：ABCD

5.制备原生质体时，酶液中通常添加的成分有（）

A.渗透压调节剂B.缓冲剂C.抗氧化剂D.抗生素

答案：ABCD

6.适合作为林木原生质体分离的材料有（）

A.叶片B.愈伤组织C.悬浮细胞D.根尖

答案：ABC

7.原生质体在林木育种中的应用包括（）

A.体细胞杂交B.遗传转化C.突变体筛选D.克隆繁殖

答案：ABC

8.提高原生质体产量和质量的措施有（）

A.优化材料预处理B.调整酶解条件C.改进纯化方法D.增加培养时间

答案：ABC

9.原生质体分离过程中需要注意的事项有（）

A.无菌操作B.控制酶解时间和温度C.防止机械损伤D.保持适宜渗透压

答案：ABCD

10.原生质体培养的用途有（）

A.再生植株B.基因表达调控研究C.制备人工种子D.生产次生代谢产物

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.任何林木组织都能用于原生质体分离。（×）

2.酶解时间越长，原生质体产量一定越高。（×）

3.原生质体有细胞壁但无细胞膜。（×）

4.沉降法是常用的原生质体纯化方法之一。（√）

5.台盼蓝可用于检测原生质体的活力，活细胞被染成蓝色。（×）

6.原生质体分离过程中不需要考虑无菌操作。（×）

7.悬浮细胞是原生质体分离的良好材料。（√）

8.提高酶解温度一定能提高原生质体的产量。（×）

9.原生质体在林木遗传改良中具有重要作用。（√）

10.密度梯度离心法不能用于原生质体纯化。（×）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述原生质体分离的基本步骤。

答案：选取合适材料，进行预处理；配制酶液，将材料放入酶液中酶解；酶解结束后，通过过滤、离心等方法收集原生质体；最后对原生质体进行纯化。

2.列举两种检测原生质体活力的方法及原理。

答案：FDA染色法，原理是FDA无荧光、无极性，可自由透过细胞膜，进入细胞后被酯酶分解产生有荧光的极性物质，有活力细胞发荧光；台盼蓝染色法，死细胞细胞膜无选择透过性，可被台盼蓝染成蓝色，活细胞不着色。

3.说明影响原生质体分离的主要因素。

答案：材料基因型不同，分离效果有差异；酶的种类和浓度影响酶解效果；酶解温度、时间不合适会影响原生质体产量和质量；渗透压不合适会导致原生质体破裂或