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林木转化体Southernblot验证试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.Southernblot实验中，用于转移DNA的膜通常是（）

A.尼龙膜B.滤纸C.保鲜膜D.玻璃纤维膜

2.提取林木基因组DNA常用的方法是（）

A.酚氯仿法B.水煮法C.乙醇沉淀法D.离子交换法

3.限制性内切酶的作用是（）

A.切割RNAB.连接DNAC.切割DNAD.合成DNA

4.Southernblot中，预杂交的目的是（）

A.封闭膜上非特异性结合位点B.使DNA变性

C.让探针与目的DNA结合D.清洗膜

5.标记探针常用的元素是（）

A.P32B.C14C.H3D.O18

6.转膜过程中，DNA是从（）转移到膜上。

A.胶B.溶液C.滤纸D.电泳槽

7.用于检测杂交信号的方法是（）

A.比色法B.放射性自显影C.荧光定量D.凝胶成像

8.杂交温度一般（）

A.越低越好B.越高越好C.有适宜范围D.随意

9.构建基因文库常用的载体是（）

A.质粒B.噬菌体C.病毒D.以上都有

10.对转化体进行Southernblot验证，是为了确定（）

A.基因是否转录B.基因是否整合到基因组

C.基因表达量D.蛋白是否表达

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.Southernblot实验步骤包含（）

A.DNA提取B.酶切C.电泳D.转膜E.杂交

2.下列属于限制性内切酶特点的是（）

A.识别特定序列B.切割双链DNAC.切割单链DNA

D.酶切位点固定E.不同酶识别序列不同

3.转膜的方法有（）

A.毛细管虹吸法B.电转法C.真空转法D.离心法E.透析法

4.选择探针时需要考虑的因素有（）

A.长度B.特异性C.标记方法D.稳定性E.来源

5.影响Southernblot杂交的因素有（）

A.温度B.盐浓度C.杂交时间D.探针浓度E.膜的类型

6.提取林木基因组DNA时，可能用到的试剂有（）

A.CTABB.氯仿C.异戊醇D.乙醇E.蛋白酶K

7.进行Southernblot实验时，需要的仪器有（）

A.离心机B.电泳仪C.杂交炉D.凝胶成像系统E.移液器

8.杂交后洗膜的目的是（）

A.去除未杂交的探针B.降低背景C.增强信号

D.使膜更干净E.让探针与DNA结合更紧密

9.可以作为DNA标记的有（）

A.MarkerB.已知大小的DNA片段C.蛋白质

D.RNAE.荧光染料标记的DNA

10.对于林木转化体验证，Southernblot与其他方法相比的优势在于（）

A.能确定基因整合情况B.可检测基因完整性

C.能判断基因拷贝数D.操作简单E.成本低

三、判断题（每题2分，共10题）

1.Southernblot只能检测基因组DNA。（）

2.所有限制性内切酶切割后的DNA末端都是粘性末端。（）

3.杂交温度越高，杂交特异性越强。（）

4.转膜时，DNA从正极向负极转移。（）

5.标记探针的放射性元素半衰期越长越好。（）

6.提取基因组DNA过程中，乙醇沉淀后可以直接进行酶切。（）

7.洗膜时间越长，杂交信号越弱。（）

8.凝胶成像系统可以直接检测到Southernblot的杂交信号。（）

9.不同来源的探针杂交效果相同。（）

10.Southernblot可以检测基因是否发生突变。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述Southernblot实验中酶切的作用。

答：酶切可将基因组DNA切成大小不同的片段，以便后续电泳分离。不同酶切位点对应不同基因区域，通过酶切可使目的基因片段暴露，利于后续杂交检测其在基因组中的情况。

2.说明预杂交在Southernblot中的意义。

答：预杂交能封闭膜上非特异性结合位点。若不进行预杂交，探针可能会非特异性结合在膜上，导致背景信号高，影响杂交结果的准确性和特异性。

3.简述转膜的重要性。

答：