生物技术制药实验指导.docVIP

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实验一植酸钙镁的制备……………….…2

实验二溶菌酶结晶的制备及活力测定………..………...5

实验三固定化细胞生产L-天冬氨酸……8

实验一植酸钙镁的制备

植酸钙镁又称菲汀,是种良好的营养药,具有促进新陈代谢、增进食欲和营养、助发育等作用。适用于治疗神经系统各种疾病、血管张力减退、癔病、神经衰弱、佝偻病、贫血和结核病等。

一、化学结构和性质

化学名称为肌醇六磷酸酯钙镁盐,呈白色粉末,无臭,溶于盐酸、硝酸和硫酸,不溶于碱水。植酸钙镁在高等植物中含量很丰富,玉米浸泡的水液可作为提取的原料,是生产玉米淀粉的副产品。米糖和麦麸也可作为原料。

二、提取方法

1、以玉米浸泡液为原料的提取法

(1)技术路线

H2SO3(浸泡)石灰乳(中和)(干燥)

玉米——————→浸出液——————→沉淀物——————→植酸钙镁

70hPH5.4-5.860~80℃

(2)工艺过程

取净化玉米投入浸泡罐内,用0.3%亚硫酸溶液在52~53℃浸泡70小时,放出浸液,搅拌下加入8Be的石灰乳,中和至pH5.4~5.8,静置1h,除去上层清液,混浊液压滤,滤饼在60~80℃烘干。对玉米质量计,总收率0.2~0.3%。

2、以植酸钙为原料的提取法

(1)技术路线

浓HCI

浓HCI(浸泡)NaOH(中和)(干燥)

工业植酸钙————→浸出液—————→沉淀物————→植酸钙镁

PH5.1通风

(2)工艺过程

按m(工业植酸钙):V(浓盐酸):V(氢氧化钠):m(活性炭):V(水)=1:1:0.625:0.04:8的配料比,投料取工业植酸钙溶于等量的浓盐酸中,加热使溶解,加入活性炭,加水稀释,过滤。滤液在搅拌下,加入120g/L(12%氢氧化钠)溶液中和至pH5.1,析出沉淀,静置,检查pH,过滤,收集滤饼用水洗至氯离子合格为止,甩干,搓成小条状,通风干燥,得植酸钙镁。对植酸钙质量计,总收率50%以上。

3、以麸皮为原料的提取法

(1)技术路线

植酸水溶液

植酸水溶液

HNO3

麸皮————

2h

HNO3(浸泡)石灰乳(中和)PH5(干燥)

麸皮渣————→浸出液————————→沉淀物—→植酸钙镁

5hNaOHPH7

(2)工艺过程

取麸皮加入4倍量的水和0.02倍量的硝酸(相对密度1.4~1.42),搅拌均匀浸2h,搅拌,取出植酸水溶液,麸皮再加入3倍量水和0.01倍量的硝酸,浸泡5h,搅拌,放出植酸水溶液,合并,pH4。加入右灰乳(100g/L)调节pH5.0~5.5,再用NaOH(10%)调pH7,静止分层,去上层清液过滤,甩干,干燥,得粗品,对麸皮计,总收率3%~3.5%。

三、试剂和器材

1、试剂

硝酸(相对密度1.4~1.42)

米糠或麦麸

NaOH

石灰

pH试纸(1~14)

2、器材

烧杯500ml2个

玻棒2个

量筒250ml2个

玻璃漏斗10cm1个

布氏漏斗10cm1个

滤纸

真空泵1台

真空干燥箱1台

移液管5ml、10ml2支

天平

搅拌器1台

四、操作过程

1、原料称取及溶液配制

称取麦麸100克,配制10%NaOH和右灰乳(100g/L)。

2、提取

米糠100克加400ml水和0.02倍量硝酸,搅拌2小时。取上清液。残渣加400ml水和0.01倍量硝酸,取上清液,合并两次上清液,抽滤去除杂质。

3、沉淀

上清液加石灰乳调pH5,用10%NaOH调pH7,静止,完全澄清后去上清液。

4、抽滤干燥抽滤后置于干燥箱中85度干燥12小时。

5、称重计算收率。并用适当的方法检验主要杂质。

作业:1、计算收率

2、分

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