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2025年生物分离与纯化技术模拟试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。请将正确选项的字母填在括号内）

1.在生物分离纯化过程中，下列哪个指标通常表示分离两个相邻组分的能力？（）

A.回收率B.载量C.分辨率D.纯度

2.下列哪种层析技术主要依据分子大小进行分离？（）

A.离子交换色谱B.亲和色谱C.凝胶过滤色谱D.吸附色谱

3.在膜分离技术中，用于去除水中盐分的主要膜过程是？（）

A.微滤B.超滤C.反渗透D.纳滤

4.下列哪种方法属于非水相分离技术？（）

A.离心B.电泳C.萃取D.超滤

5.生物大分子（如蛋白质）纯化过程中，通常将缓冲液更换以去除杂蛋白的方法称为？（）

A.沉淀B.透析C.筛分D.灭活

6.下列哪种吸附剂的吸附能力主要源于表面非极性基团与溶质分子之间的范德华力？（）

A.活性炭B.强碱性阴离子交换树脂C.强酸性阳离子交换树脂D.金属螯合树脂

7.在设计一个蛋白质纯化流程时，选择第一个纯化步骤的主要依据通常是？（）

A.目标蛋白的浓度B.目标蛋白与杂质的含量比C.目标蛋白的稳定性D.预期最终纯度

8.下列关于凝胶过滤色谱的描述，哪一项是错误的？（）

A.分子量大的分子先流出B.分子量小的分子先流出C.分离是基于分子大小差异D.属于逆相层析

9.亲和色谱利用了生物分子之间的高度特异性相互作用，最常用的配体是？（）

A.离子B.氢键C.抗体D.螯合剂

10.生物分离纯化过程中，通常会导致产品损失和纯度下降的操作是？（）

A.透析B.超滤C.沉淀D.层析

二、填空题（每空1分，共15分。请将答案填在横线上）

1.分辨率是衡量层析分离效果的重要指标，其值通常在__________之间。

2.在离子交换色谱中，增加洗脱液离子强度通常会使带__________电荷的蛋白质先被洗脱下来。

3.膜分离技术的分离过程通常在__________压力或__________力梯度下进行。

4.吸附剂的载量是指单位质量吸附剂所能吸附的溶质的__________。

5.生物分离纯化通常包括样品准备、__________、__________和成品制备等主要步骤。

6.亲和层析中，常用的洗脱方法包括改变pH值、改变离子强度或使用特异性竞争分子。

7.在离心操作中，描述沉降速度快慢的参数是__________。

8.优化生物分离纯化过程常用的实验设计方法包括正交试验和__________法。

9.选择生物分离纯化技术时，需要综合考虑目标物质的性质、__________、__________和成本等因素。

三、名词解释（每题3分，共15分）

1.分辨率

2.载量

3.传质阻力

4.等度洗脱

5.下游处理

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述凝胶过滤色谱（GelFiltrationChromatography）的分离原理及其应用特点。

2.简述离子交换色谱的基本原理，并说明影响交换容量的因素有哪些。

3.生物分离纯化过程中，为什么要进行缓冲液交换？常用的交换方法有哪些？

4.简述膜分离技术在生物分离纯化中的主要优势。

五、论述题（每题10分，共20分）

1.论述选择生物分离纯化方法时需要考虑的主要因素及其内在逻辑。

2.以一种你熟悉的蛋白质（如酶）为例，设计一个包含至少两种不同分离纯化技术的简短纯化流程，并简要说明每一步的原理和目的。

六、计算题（共10分）

某样品溶液体积为500mL，含有目标蛋白10mg/mL。将其上样到层析柱（装填体积为100mL），目标蛋白在层析柱上的平均分布体积（假设为空隙体积）为50mL。若洗脱液流过层析柱的流速为1mL/min，计算：

（1）目标蛋白在柱上的载量是多少？（以mg/g吸附剂计，假设吸附剂干重为100g，且填装密度与水相似）

（2）理论上，该批样品中目标蛋白的回收率是多少？

（3）若采用等度洗脱，目标蛋白洗脱所需的时间大约是多少？（假设洗脱过程已达到平衡）

试卷答案

一、选择题

1.C

2.C

3.C

4.C

5.B

6.A

7.B

8.D

9.C

10.C

二、填空题

1.0.8-1.5

2.同

3.压力；浓度

4.量

5.