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2025年生物催化在化学制药中的应用实操考核卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、

简述酶作为生物催化剂在化学制药中相比传统化学合成方法的主要优势，并列举至少三个你所在领域或你感兴趣的药物分子，说明酶催化可用于其合成或修饰的特定环节。

二、

某手性药物中间体C需要通过不对称催化构建手性中心。现有两种手性酶A和B均能催化底物转化为C，但具有不同的立体选择性（酶A的ee值为90%，酶B的ee值为60%）和反应速率（酶A的kcat/KM值为1000M^-1s^-1，酶B的kcat/KM值为500M^-1s^-1）。假设其他条件（如底物浓度、缓冲液组成）对两种酶的影响相同。请分析：

1.从目标产物C的光学纯度角度看，应选择哪种酶？简要说明理由。

2.从转化效率（单位时间内获得产物C的量）角度看，哪种酶可能更有优势？简要说明理由。

3.如果底物对酶B具有显著抑制，这种情况会如何影响你的选择？请解释。

三、

设计一个利用固定化脂肪酶催化酯化反应（例如，将正丁醇和乙酸转化为正丁酸乙酯和水）的实验室规模（假设100mL反应体积）实验方案。请详细说明：

1.选择固定化脂肪酶的理由（至少两点）。

2.简述固定化方法（选择一种即可，如吸附法、交联法、包埋法）及其基本步骤。

3.概述反应条件的选择依据（包括溶剂、底物浓度、温度、pH、催化剂用量、反应时间等关键参数的设定理由）。

4.简述反应进程的监测方法和预期产物分析手段。

四、

在以重组酶M催化某重要药物合成中间体P的连续流反应器实验中，发现产物P的收率逐渐下降。请分析可能导致此现象的三个主要因素，并针对每个因素提出至少一种可能的解决方案或进一步的探究方向。

五、

某制药公司希望开发一种新的生物催化方法来替代现有的化学方法合成某杂质Q。现有研究表明，一种特定的工程菌X可以将前体S转化为Q。请评估将此生物催化方法应用于去除杂质Q的可行性，并至少提出两个需要克服的技术挑战及相应的应对策略。

试卷答案

一、

酶作为生物催化剂在化学制药中的主要优势包括：

1.高立体选择性：能特异性地合成手性化合物，避免立体异构体的繁琐分离，提高药物纯度和有效性。

2.环境友好：通常在温和的生理条件下（中性pH、室温）进行，可使用水作为溶剂，减少有机溶剂的使用和环境污染。

3.条件温和：反应条件温和，能耗较低，有助于保护敏感官能团，减少副反应。

4.可逆性：许多生物催化反应是可逆的，便于通过改变反应条件实现化学合成难以达成的转化平衡。

5.底物特异性：对底物结构有高度特异性，可用于合成复杂结构或难以通过化学方法合成的分子。

6.易于控制：酶的活性可以通过调节温度、pH、抑制剂等因素进行有效控制。

可列举的药物分子示例（根据实际情况选择）：

*阿司匹林（乙酰水杨酸）：可利用脂肪酶进行手性拆分或酰化反应。

*氯霉素：含有手性中心，可利用酶进行不对称合成。

*他汀类降脂药（如阿托伐他汀）：合成路线中常涉及酶催化进行手性构建或羟基化等步骤。

二、

1.从目标产物C的光学纯度角度看，应选择酶A。理由：酶A具有更高的ee值（90%vs60%），能直接得到光学纯度更高的产物C，减少了后续纯化或拆分的步骤，提高了效率和经济性。

2.从转化效率（单位时间内获得产物C的量）角度看，酶B可能更有优势。理由：虽然ee值较低，但酶B的kcat/KM值（500M^-1s^-1）高于酶A（1000M^-1s^-1）的数值（假设KM类似），意味着在相同的底物浓度下，酶B可能具有更高的反应速率常数（kcat），即更快地消耗底物并生成产物（无论是对映异构体还是非对映异构体），从而在单位时间内可能产生更多的产物总量（尽管其中一部分是非目标异构体）。

3.如果底物对酶B具有显著抑制，这种情况会改变选择。应优先考虑酶A。理由：虽然酶B在无抑制情况下转化效率可能更高，但底物抑制会显著降低酶B的实际催化效率，甚至可能使其表现劣于酶A。酶抑制的动力学复杂，需要具体分析，但通常选择对抑制不敏感或抗抑制性强的酶更可靠。酶A具有更高的初始选择性和相对不受此特定抑制影响（假设其活性不受影响），因此是更稳妥的选择。

三、

实验方案设计：

1.选择固定化脂肪酶的理由：

*提高稳定性：固定化酶通常比游离酶具有更好的热稳定性和化学稳定性，便于储存和重复使用。

*易于分离：固定化颗粒可以轻易通过过滤或离心从反应