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检验技术资格考试考点精要一一微生物学检验1中级)
1.生物学按界门纲目科属种分类种是最小单位。超净工作台应承受层流技术净化空气、选
择垂直气流通风方式。
2.结核菌可利用甘油为破源梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源流感嗜血杆菌要V,X因子才
能生长。
3.药物敏感试验:纸碟法、小杯法、凹孔法、试管法。常用:单片纸碟法、试管稀释法(以
抗菌药物的最高稀释度仍能抑制细菌生长或杀菌管为终点该管含药浓度为最低抑菌浓度MIC或最低
杀菌浓度MBC),两值越低则表示越敏感。MIC与抑菌圈呈负相关即抑菌环直径越大MIC越小。
4.常用的免疫技术:酶免疫技术E(IA)、协同凝集试验、免疫荧光技术I(F)、对流免疫电泳
:CIE)s免疫印迹技术。
病原菌核酸的检测:核酸杂交、PCR技术、基因芯片技术八
PCR技术一是选择DNA或RNA体外扩增技术用标本提取DNA为扩增模板选用一对特异寡核
昔酸为引物PCR一般要经受三十屡次循环经不同温度变性93-94℃作[用Imin氢键断裂形成单
链DNA)、退火40-60℃快[速冷却30-60s引物与D、A模板结合形成局部双链)、延长70-75℃在(
TaqDNA聚合酶作用下以A、T、G、C四种脱氧核甘酸为原料从引物5端-3端延长合成与
模板互补的DNA迷)扩增产物用澳乙咤染色的凝胶电泳。其具有特异、快速、灵敏、特异性强、
操作简便、能够定量。
基因芯片技术D(NA芯片、DNA微阵列一主要过程:DNA微阵列的制备、样品的制备、靶分子
和探针之间的杂交、杂交信号的检测与分析。具有快速、敏感、高通量检测平台。
核酸杂交基(因探针杂交技术一是指单链RNA和I\A或DNA和DNA或RNA和RNA,依据碱基
配对原则,借氢键相连而形成杂交分子的过程。杂交百分率>70%N(69%为高度同源性,同源性
在60%以.上是一个种,同源性在60%―70%是同一种内不同亚种,同源性在20%—60%同一属内不同菌
和,同源性20%W不同属的菌种。
AFLP的含义是一扩增片段长度多态性。有很大功能的DNA指纹技术。一种是罕见切割酶,一
和是常用切割随。具有RFLP技术的牢靠性和PCR技术的高效性。
5.细菌诊断流程有:双岐索引法,表解法,数字编码鉴定法。致病性岛:由基因编玛打算的一
团与致病性相关的基因组。
6.病原细菌确定原则:郭(霍Koch原则1、从一种疾病病人中能有规律地觉察一种细菌2、
能够分别这种细菌获得纯培育3、把这种细菌的培育物引入易感动物体内,可以引起与病人类似的疾
病4、在试验感染引起的疾病口照旧能够分别同一种细菌。
7.杆菌肽用于A敏(感与非A群链球菌的鉴定。0/129抑菌试验对弧菌有用而对气单胞菌无
用。
8.奥普托欣试验:肺炎链球菌敏感。半数致死量LD£O—导致半数动物死亡的细菌感染量。
最小全数致死量CILD一引起全部动物死亡的最小感染剂量。半数感染量(ID50—导致半数组
织培育细胞发生感染的细菌数量或毒素剂量。
9.杂交分:斑点,菌落原位,SouthernD(NA)印迹,NorthernR(XA,DNA)印迹<
10.I.型细菌:细胞缺陷形〔态多样,染色不定,可过滤,渗透压敏感,生化减弱等)培育
应高渗透压3(-5%氯化钠、20$蔗糖),染色多为G染阴性,形态不一(巨球形是特征)固定要用
10g/L鞍酸不能用火焰。
增殖:以二分裂、出芽、巨形体释放颗粒方式。一般菌落有:油煎蛋样L(),颗粒型G(),丝状
菌落F(),鉴定要点:染色易变多形性,生长在增菌液中微浑,颗粒样沉淀或沿试管生长,返祖
现象。致病特点:慢性和反复发作性感染。L型细菌在体内体外都可形成。原生质体与原生质球都是
细胞缺陷的细菌。
11.细菌的突变:基因突变又(称点
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