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流式细胞术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、单项选择题（每题2分，共20分。下列每小题备选答案中，只有一个是符合题意的，请将正确选项的代表字母填在题后的括号内。）

1.流式细胞仪产生荧光信号的部件是？

A.液流系统

B.光学系统中的检测器

C.电子系统

D.流式池

2.在FSC/SSC散点图中，通常FSC轴代表什么信息？

A.细胞表面标志物的表达水平

B.细胞内颗粒物质的含量

C.细胞的相对大小或核质含量

D.细胞的相对数量

3.用于流式细胞术检测细胞凋亡最常用的荧光染料是？

A.碘化丙啶（PI）

B.胭脂黄（YOYO-1）

C.7-氨基放线菌素D（7-AAD）

D.FITC标记的抗体

4.当细胞经过荧光素标记的抗体染色后，使用特定激光激发，检测器检测到的信号主要来源于？

A.流式池的液流冲击

B.细胞自身产生的荧光

C.激发光在细胞内的散射

D.染料分子与细胞成分的化学反应

5.在流式细胞术实验中，使用Ficoll-Paque等密度梯度离心分离细胞亚群的主要原理是？

A.根据细胞表面标记物的不同进行选择

B.根据细胞内DNA含量的不同进行分离

C.根据细胞的密度（大小和浮力）进行分离

D.根据细胞膜的通透性进行分离

6.下列哪种荧光染料或探针常用于流式细胞术进行细胞周期分析？

A.PE-Cy7标记的抗体

B.胭脂红（YOYO-1）

C.碘化丙啶（PI）

D.FITC标记的DAPI

7.设门（Gating）在流式细胞术数据分析中的主要目的是？

A.对细胞进行物理分离

B.选择感兴趣的目标细胞群体，排除背景噪声和死细胞

C.对荧光信号进行定量

D.校正荧光淬灭效应

8.SSC（侧向散射光）信号主要反映什么细胞结构？

A.细胞膜脂质组成

B.细胞核的大小和形态

C.细胞质内颗粒物质（如颗粒线粒体、溶酶体）的含量和复杂度

D.细胞表面受体的表达水平

9.以下哪种荧光染料在激发光波长较短（如488nm）时发出绿光（FITC），而在较长波长（如633nm）时发出红光（PE）？

A.APC（藻红蛋白）

B.PE-Cy7

C.PerCP-Cy5.5

D.CD45-FITC/CD3-PE

10.进行多色流式细胞术检测时，为了减少荧光串色，优先选择的荧光标记方法是？

A.将所有抗体都用FITC标记

B.将不同通道的抗体标记为具有最大波长差异的荧光染料（如FL1用FITC，FL4用APC）

C.使用同种荧光染料标记不同抗体的所有细胞

D.尽量减少抗体浓度

二、名词解释（每题3分，共15分。请用简洁的语言解释下列名词的含义。）

1.流式细胞术(FlowCytometry)

2.散射光(ScatterLight)

3.荧光淬灭(FluorescenceQuenching)

4.设门(Gating)

5.细胞凋亡(Apoptosis)

三、简答题（每题5分，共20分。请简要回答下列问题。）

1.简述流式细胞仪进行细胞分选（FACS）的基本原理。

2.列举至少三种流式细胞术常用的荧光染料，并简述其基本特性。

3.在进行细胞内因子染色时，为什么通常需要使用固定和通透化步骤？请简述其原理。

4.简述使用PI染料进行细胞周期分析的原理。

四、论述题（每题10分，共30分。请结合所学知识，详细论述下列问题。）

1.详细说明流式细胞术样本制备过程中需要注意的关键步骤及其原因。

2.选择一种你感兴趣的流式细胞术应用（如免疫分型、细胞因子检测、凋亡研究等），简述其基本实验流程、需要使用的荧光标记以及如何通过设门分析获取所需信息。

3.讨论流式细胞术技术在现代生物学研究中的优势和应用前景。

试卷答案

一、单项选择题

1.B

2.C

3.C

4.B

5.C

6.C

7.B

8.C

9.D

10.B

二、名词解释

1.流式细胞术(FlowCytometry):一种可对悬浮的单细胞或其他生物颗粒进行快速计数和分选的技术。通过让细胞流经激光束，利用光学和电子系统检测细胞通过时产生的散射光和荧光信号，并对细胞进行定量分析和/或分选。

2.散射光(ScatterLight):当激光束照射