CN118416083B 一种利用大肠杆菌胞外多糖抗生物膜的方法 （中国科学院理化技术研究所）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN118416083B(45)授权公告日2025.07.08

(21)申请号202311684468.2

(22)申请日2023.12.08

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN118416083A

(43)申请公布日2024.08.02

(73)专利权人中国科学院理化技术研究所

地址100190北京市海淀区中关村东路29

号

(72)发明人牛忠伟万晨潇田野

(74)专利代理机构北京正理专利代理有限公司11257

专利代理师潘登

A61P31/04(2006.01)

A01N43/16(2006.01)

A01P1/00(2006.01)

CO7H3/02(2006.01)

CO7H7/033(2006.01)

CO7H1/00(2006.01)

(56)对比文件

US2009318382A1,2009.12.24

注意：

申请人在申请日后补交了实验数据，但该数据并未包含在本授权公告文档中。

审查员安梦晨

(51)Int.CI.

A61K31/7004(2006.01)

A61K31/7012(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图5页

(54)发明名称

一种利用大肠杆菌胞外多糖抗生物膜的方

法

(57)摘要

CN118416083B本发明公开一种利用大肠杆菌胞外多糖抗生物膜的方法。所述方法是利用大肠杆菌胞外多糖抑制细菌生物膜的形成以减少生物膜形成总量；以及分散细菌成熟生物膜以减少已经成熟的生物膜的原有总量；其中，所述大肠杆菌胞外多糖由以下摩尔百分数的单糖组成：甘露糖26.79%、半乳糖21.42%、葡萄糖醛酸15.71%、核糖14.65%、葡萄糖14.20%、阿拉伯糖4.63%、岩藻糖1.15%、木糖0.83%,其余为半乳糖醛酸。在该方法中，大肠杆菌胞外多糖可以预防细菌生

CN118416083B

CN118416083B权利要求书1/1页

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1.大肠杆菌胞外多糖在制备抑制细菌生物膜的形成及分散细菌成熟生物膜的药物中的应用，其特征在于，大肠杆菌为ATCC25922,所述细菌为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，所述药物抑制细菌生物膜的形成以减少生物膜形成总量；以及分散细菌成熟生物膜以减少已经成熟的生物膜的原有总量；

其中，所述大肠杆菌胞外多糖按照如下步骤制备得到：

挑取大肠杆菌ATCC25922菌落置于LB培养基中扩增，在37℃摇床培养18-24h,将扩增后的大肠杆菌菌液在10000×g、4℃下离心15min,弃去细菌沉淀，取上清液，在上清液中缓慢加入其3倍体积以上的无水乙醇，4℃搅拌4-12h,得到悬浊液，将悬浊液在10000×

g、4℃下离心15min后，弃去上清液，将沉淀用Tris-HCl重悬，并加入蛋白酶k后在37℃摇床中孵育4h后，将溶液置于90℃水浴并孵育10min,冷却后加入其3倍体积以上的无水乙醇，在4℃搅拌4-12h,得到悬浊液，将悬浊液10000×g、4℃下离心15min,弃去上清液，沉淀用超纯水重悬，得到的重悬液使用8000-14000kDa的透析袋进行2-3天的透析，冻干后得到大肠杆菌胞外多糖；

所述大肠杆菌胞外多糖由以下摩尔百分数的单糖组成：甘露糖26.79%、半乳糖21.42%、葡萄糖醛酸15.71%、核糖14.65%、葡萄糖14.20%、阿拉伯糖4.63%、岩藻糖1.15%、木糖0.83%,其余为半乳糖醛酸；

所述大肠杆菌胞外多糖在红外光谱中3423、2920、1642和1066cm?1处出峰。

CN118416083B说明书1/8页

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一种利用大肠杆菌胞外多糖抗生物膜的方法

技术领域

[0001]本发明涉及抗菌技术领域。更具体地，涉及一种利用大肠杆菌胞外多糖抗生物膜的方法。

背景技术

[0002]目前，细菌感染严重威胁着人类的生命安全健康，除了众所周知的微生物耐药性问题，微生物生物