柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆、表达与酶活性分析.docx

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2026-01-19 发布于中国
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研究报告

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柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆、表达与酶活性分析

一、1.柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆

1.1基因提取与纯化

(1)柔嫩艾美耳球虫5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的提取是研究该酶功能的第一步。本研究中，我们采用酚-氯仿法提取柔嫩艾美耳球虫的总DNA。经过实验验证，该方法的提取效率达到90%以上。具体操作如下：首先，将柔嫩艾美耳球虫虫体置于液氮中研磨成粉末，然后加入含有酚和氯仿的溶液进行抽提，接着通过离心去除蛋白质和脂质等杂质，最后将上清液加入等体积的异丙醇，静置后析出DNA沉淀。通过这种方法，我们成