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分子生物学检验技术复习题与答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共30分。请将正确选项的字母填在括号内）

1.聚合酶链式反应（PCR）技术的基本原理是（）。

A.基因重组

B.基因突变

C.基因扩增

D.基因测序

2.在PCR反应体系中，通常不包含（）。

A.模板DNA

B.引物

C.耐热DNA聚合酶

D.RNA聚合酶

3.下列哪种引物设计原则是错误的？（）

A.引物长度通常为18-25bp

B.引物内部不应存在二级结构（如发夹）

C.引物meltingtemperature(Tm)应该接近

D.引物可以在模板DNA的两条链上同时结合

4.Sanger测序法利用了哪种荧光标记的核苷酸？（）

A.dATP-F

B.dGTP-R

C.dCTP-G

D.dUTP-C

5.限制性核酸内切酶识别和切割DNA的特定序列称为（）。

A.密码子

B.反密码子

C.回文序列

D.操作子

6.基因芯片（Microarray）技术主要利用了（）原理。

A.DNA杂交

B.限制性酶切

C.PCR扩增

D.电泳分离

7.实时荧光定量PCR（Real-timePCR）中，用于监测PCR进程的荧光信号通常来自（）。

A.TaqMan探针

B.激光激发

C.电化学传感器

D.摄影记录

8.下列哪种技术属于“下一代测序”（Next-GenerationSequencing,NGS）？（）

A.Sanger测序法

B.基因芯片技术

C.IonTorrent测序

D.基因测序仪

9.PCR产物大小通常通过（）进行分离和鉴定。

A.毛细管电泳

B.超速离心

C.凝胶电泳

D.薄层色谱

10.克隆载体（Vector）通常需要具备哪些特性？（多选，请写出选项字母）

A.能够自我复制

B.具有选择标记

C.含有多个限制性酶切位点

D.能够抵抗宿主细胞的降解

11.基因编辑技术CRISPR-Cas9的“剪刀”功能主要是由（）介导的。

A.Cas蛋白

B.gRNA(guideRNA)

C.dNTPs

D.DNA连接酶

12.分子诊断技术相比传统诊断方法的主要优势包括（多选，请写出选项字母）。

A.灵敏度高

B.特异性强

C.速度更快

D.操作更简便

13.在分子生物学实验室中，处理含病原体的样本时，哪个级别的生物安全柜（BiosafetyCabinet）防护能力最强？（）

A.I级

B.II级

C.III级

D.IV级

14.基因测序的主要目的是（）。

A.测定DNA的物理长度

B.确定DNA序列中碱基的排列顺序

C.计算DNA的GC含量

D.分析DNA的二级结构

15.以下哪种方法不适用于检测基因表达水平？（）

A.Northernblotting

B.RT-qPCR

C.DNA测序

D.基因芯片

二、填空题（每空2分，共10分）

1.PCR反应一般需要经历________、________和________三个基本步骤。

2.Sanger测序法中，根据ddNTPs的终止作用，可以得到一系列不同长度的________，通过电泳分离后，根据荧光信号可确定DNA序列。

3.基因芯片根据其检测对象的不同，可分为________芯片和RNA芯片等。

4.在PCR引物设计中，通常要求两引物的meltingtemperature(Tm)差值不应超过________。

5.分子诊断实验室废弃物处理必须遵循________原则，防止病原体扩散。

三、名词解释（每题3分，共15分）

1.聚合酶链式反应（PCR）

2.基因测序（GeneSequencing）

3.MeltingTemperature(Tm)

4.限制性核酸内切酶

5.分子诊断（MolecularDiagnosis）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PCR技术的原理及其基本应用。