50L生物反应器工艺放大与验证实验报告.pdfVIP

50L生物反应器实验报告（B50-24）

1.50L生物反应器工艺研究

1）实验目的

在5L、10L生物反应器实验的基础上，通过50L生物反应器进行工艺的进

一步放大和确认，以确定出更好的实验参数，供200L放大时参考、使用。

2）实验设计

根据AMBR中的一组实验，将其进行放大至50L生物反应器。观察其生产过

程是否具有可重复性；过程是否、稳定；产物的质和量是否符合要求。

表1：50L生物反应器实验设计表

实验代号C50-24

细胞31-2G2-31C4-4P/200M

接种密度1×106cell/ml

温度Day0-4:36.8℃;D4-D11：35.0℃

溶氧50%

搅拌转速60rpm

扩种过程(L)

基础培养基15.58g/LCDCHOGrow™CDDF

1无培养基+0.877g/L(6mM)

L-Glutamine（DF1L）

补料培养基Feed20

补料速率系数75

葡萄糖补加至如果VCD10e6cell/ml,Glc=3

1target

g/L,否则Glctarget=4g/L

培养时间11

3）实验结果

①细胞生长

从图1中看出：此细胞在培养过程中的细胞数不断增加，到D8天时达到峰值，

密度为15.070e6cells/ml，第八天开始，细胞密度逐渐降低，在收获当天密度为：

10.920e6cells/ml。

图1细胞密度生长曲线

图2细胞活率生长曲线

②抗体产量

图3为50L生物反应器的抗体产量曲线。在收获当天，IgG的产量最高，在1g/L

左右。

图3细胞产量曲线

③电荷异质性

④生物学活性

4)小结

通过这批50L生物反应器的生产，确定了此次工艺为稳定可操作的。接下来，

将其扩大到200L生物反应器上，观察期放大的效果。