不同温度制备生物炭对蔬菜土壤中沙门氏菌存活的影响.docxVIP

研究报告

PAGE

1-

不同温度制备生物炭对蔬菜土壤中沙门氏菌存活的影响

一、实验材料与方法

1.生物炭的制备

生物炭的制备方法主要包括快速热解法、慢速热解法、活化法等。快速热解法是通过在高温下快速加热生物质，使其在无氧或低氧环境下迅速分解，从而制备出生物炭。这种方法通常在500-1000℃的温度范围内进行，制备时间较短，大约在几分钟到几十分钟之间。例如，我国某研究团队采用快速热解法制备生物炭，通过将玉米秸秆在900℃下热解2小时，成功制备出比表面积为1500m2/g的生物炭，该生物炭对重金属离子具有较好的吸附性能。

慢速热解法是将生物质在较低的温度（通常在200-500℃）下缓慢加热，使其在热解过程中发生化学反应，最终形成生物炭。这种方法制备的生物炭具有更高的比表面积和孔隙结构，有利于提高其吸附性能。例如，美国某研究团队采用慢速热解法制备生物炭，通过将木屑在300℃下热解6小时，制备出的生物炭比表面积达到2000m2/g，对有机污染物的吸附效果显著。

活化法是在生物炭制备过程中加入活化剂，如磷酸、氢氧化钠等，通过活化剂的化学作用，增加生物炭的比表面积和孔隙结构，从而提高其吸附性能。活化法分为物理活化法和化学活化法。物理活化法通过机械搅拌、超声波等方法，使生物质在活化剂的作用下发生物理变化，从而制备出具有较高孔隙结构的生物炭。化学活化法则通过化学试剂与生物质发生化学反应，生成具有较高比表面积的生物炭。例如，我国某研究团队采用化学活化法制备生物炭，通过将稻壳与磷酸混合，在800℃下热解2小时，制备出的生物炭比表面积达到3000m2/g，对染料分子的吸附效果极佳。

2.蔬菜土壤的采集与处理

(1)蔬菜土壤的采集工作通常在晴朗的天气进行，以确保土壤样本的干燥和均匀性。采集地点选择在蔬菜种植区域，使用土壤采集器按照S形路线进行采集，以覆盖不同种植区域的土壤。采集深度一般为0-20厘米，采集样本量根据研究需求确定，通常为500-1000克。

(2)采集到的土壤样本需迅速放入干净的塑料袋中，避免样品受到外界污染。在采集现场，对土壤样本进行初步的混匀处理，确保样本的代表性。随后，将样本带回实验室，放置在阴凉通风处自然风干，去除多余水分。风干过程中，定期翻动土壤样本，以防结块。

(3)风干后的土壤样本需进行过筛处理，以去除杂质和较大颗粒。一般使用2毫米的筛网进行过筛，以确保土壤样品的细度符合实验要求。过筛后的土壤样品需再次混匀，确保各部分成分均匀。随后，根据实验需求，对土壤样本进行适当的化学处理，如酸碱调节、消毒等，以确保实验数据的准确性。

3.沙门氏菌的接种与培养

(1)沙门氏菌的接种过程要求在无菌条件下进行，以防止污染。首先，将预先制备好的沙门氏菌菌种从冷冻保存的培养基中取出，在无菌操作台中轻轻摇匀。然后，使用无菌接种环蘸取少量菌液，在无菌平板的边缘进行划线接种，确保接种线清晰且均匀。接种后，将平板倒置放入培养箱中，在适宜的温度（通常为37℃）下培养18-24小时，以便沙门氏菌充分生长。

(2)在培养过程中，需定期检查平板上的菌落生长情况，以评估接种效果。沙门氏菌在平板上形成的菌落通常呈圆形、光滑、边缘整齐，颜色为无色或略带黄色。如果发现菌落生长不良或出现杂菌污染，应立即停止培养，并对操作过程进行复盘，查找原因。此外，为确保接种的准确性，可设置阳性对照和阴性对照，分别使用已知污染和不污染的样本进行培养，以监控实验环境的无菌状态。

(3)培养完成后，需从平板上挑取单个菌落进行纯化，以确保实验使用的沙门氏菌为纯种。挑取菌落时，使用无菌接种环在平板边缘轻轻触碰，然后将菌环挑入新的无菌平板中。重复此过程，直至获得纯化的沙门氏菌菌落。纯化后的菌落可接种至液体培养基中进行扩大培养，以便进行后续的实验研究。在扩大培养过程中，需定期观察菌液的澄清度和颜色变化，以确保菌液浓度适宜。培养完成后，将菌液分装于无菌试管中，并置于-80℃的低温冰箱中保存，以备后续实验使用。

二、生物炭制备条件

1.不同温度对生物炭结构的影响

(1)不同温度对生物炭的结构影响显著。研究表明，在较低温度（如400-500℃）下制备的生物炭，其比表面积和孔隙体积相对较低，而孔径分布较为均匀。例如，一项研究发现，在450℃下热解木屑制备的生物炭，其比表面积为500m2/g，孔隙体积为0.3cm3/g，孔径主要集中在2-10nm范围内。而在较高温度（如800-1000℃）下制备的生物炭，其比表面积和孔隙体积显著增加，孔径分布则更为宽泛。如在900℃下热解制备的生物炭，比表面积可达1500m2/g，孔隙体积为0.6cm3/g，孔径分布从纳米级到微米级均有分布。

(2)温度对生物炭的微观结构也有显著影响。在较低温度下，生物质的热解过