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反向遗传学技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.反向遗传学研究的核心目标是？

A.从基因组序列推导基因功能

B.从基因功能推导基因组序列

C.研究基因表达调控

D.研究基因突变类型

2.以下哪种技术通常不用于反向遗传学中基因功能的鉴定？

A.基因敲除(Geneknockout)

B.RNA干扰(RNAi)

C.基因芯片(Genechip)

D.基因测序(Genomesequencing)

3.基因敲除技术中，最常用的方法是？

A.反转录酶介导的缺失(RDA)

B.RNA引导的位点特异性重组(RNP)

C.同源重组(Homologousrecombination)

D.CRISPR/Cas9基因编辑

4.RNA干扰技术的主要机制是？

A.引起基因点突变

B.通过双链RNA(dsRNA)诱导特定mRNA降解

C.提高基因转录水平

D.改变基因启动子活性

5.基因芯片技术在反向遗传学中主要用于？

A.测序基因组DNA

B.鉴定基因突变

C.定量分析基因表达谱

D.定位基因在染色体上的位置

6.基因捕获(Genetrapping)技术的主要原理是？

A.利用已知基因序列设计探针捕获同源序列

B.将报告基因插入基因组随机位点，筛选表达该报告基因的细胞

C.通过PCR扩增特定基因片段

D.利用RNAi沉默特定基因

7.基因敲入(Geneknock-in)技术与基因敲除技术的根本区别在于？

A.使用的载体不同

B.使用的同源臂长度不同

C.引入的序列是破坏性的vs.替换性的或添加性的

D.筛选方法不同

8.CRISPR/Cas9系统在反向遗传学中的主要优势是？

A.只能敲除基因

B.可用于基因敲除、敲入、激活或抑制

C.只能用于植物遗传学研究

D.操作复杂，成本高昂

9.亚细胞定位技术（如免疫荧光）在反向遗传学研究中通常用于？

A.确定基因敲除后的表型

B.鉴定基因敲除后的突变类型

C.研究基因产物的细胞定位和功能

D.筛选与目标基因共表达的基因

10.反向遗传学策略的选择通常取决于？

A.研究目的、模型系统、基因大小、经费预算等

B.基因组序列的完整性

C.基因表达水平的高低

D.实验室的技术能力

二、填空题（每空1分，共10分）

1.反向遗传学是指从出发，研究基因功能的技术策略。

2.利用RNA干扰沉默基因功能，其分子机制主要涉及和的相互作用。

3.基因敲除技术通常导致基因的________状态，而基因敲入技术则可以在特定位点引入________。

4.基因芯片根据检测对象不同，可分为________芯片和________芯片两大类。

5.CRISPR/Cas9系统识别靶向DNA序列依赖于________识别，并通过________机制切割DNA。

三、名词解释（每题2分，共10分）

1.反向遗传学(ReverseGenetics)

2.RNA干扰(RNAinterference,RNAi)

3.同源重组(Homologousrecombination)

4.基因捕获(Genetrapping)

5.基因敲入(Geneknock-in)

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述反向遗传学与正向遗传学的区别与联系。

2.简述RNA干扰技术在反向遗传学研究中的优势。

3.简述利用CRISPR/Cas9系统进行基因敲除的基本步骤。

4.简述基因芯片技术在反向遗传学研究中可能遇到的局限性。

五、论述题（10分）

结合你所学知识，论述在模式生物（如小鼠、果蝇、线虫）中如何综合运用多种反向遗传学技术（至少三种）来系统研究一个未知基因的功能。

试卷答案

一、选择题

1.A

2.D

3.C

4.B

5.C

6.B

7.C

8.B

9.C

10.A

二、填空题

1.基因组序列(或基因)

2.siRNA(smallinterferingRNA),RISC(RNA-inducedsilencingcomplex)

3.失活(或