细胞培养基无菌配制技师（中级）考试试卷及答案.docVIP

细胞培养基无菌配制技师（中级）考试试卷及答案

一、填空题（每题1分，共10分）

1.细胞培养基常用的基础液类型包括MEM、DMEM和______。

2.无菌过滤培养基的滤膜孔径通常为______μm。

3.血清灭活的标准温度是______℃，时间30分钟。

4.CO?培养箱维持培养基pH的常用CO?浓度为______%。

5.培养基中调节pH的主要试剂是______。

6.超净工作台使用前紫外线消毒时间一般为______分钟。

7.含血清培养基的储存温度通常为______℃（避光）。

8.细胞培养基中常用的抗生素组合是______-链霉素。

9.培养基无菌检测需在______℃条件下培养7天。

10.细胞培养基的渗透压正常范围是______mOsm/kg。

二、单项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞培养基的适宜pH范围是（）

A.6.0-6.5B.7.0-7.4C.7.8-8.2D.8.5-9.0

2.以下不能高压灭菌的试剂是（）

A.双蒸水B.血清C.基础培养基粉末D.抗生素溶液

3.过滤除菌前，含血清培养基通常需先（）

A.离心B.煮沸C.加酒精D.加NaOH

4.超净工作台的HEPA滤膜主要过滤（）

A.细菌B.病毒C.真菌孢子D.颗粒

5.培养基中加入血清的主要作用是（）

A.调节渗透压B.提供生长因子C.杀灭细菌D.稳定pH

6.无菌操作时，手消毒常用（）

A.75%酒精B.0.1%新洁尔灭C.碘伏D.双氧水

7.无血清培养基的储存温度可选择（）

A.4℃B.-20℃C.室温D.37℃

8.培养基无菌检测不合格的表现是（）

A.无浑浊B.无菌落C.出现菌落D.pH稳定

9.以下属于细胞培养基缓冲对的是（）

A.NaHCO?-CO?B.NaCl-HClC.葡萄糖-蔗糖D.血清-白蛋白

10.超净工作台使用时，风机开启时间应不少于（）

A.1分钟B.5分钟C.10分钟D.15分钟

三、多项选择题（每题2分，共20分）

1.细胞培养基无菌配制的关键要点包括（）

A.超净台消毒B.手消毒C.试剂无菌D.避免交谈

2.血清灭活的目的是（）

A.灭活补体B.杀灭支原体C.去除细菌D.稳定营养成分

3.培养基pH异常的原因可能是（）

A.NaHCO?添加不足B.CO?浓度偏离C.温度过高D.试剂污染

4.过滤除菌的注意事项有（）

A.滤膜孔径0.22μmB.避免滤膜破裂C.过滤前排气泡D.过滤后立即使用

5.细胞培养基常用的抗生素是（）

A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.四环素

6.培养基储存的要求是（）

A.4℃避光B.避免反复冻融C.密封D.加血清后立即用

7.无菌检测的方法包括（）

A.直接接种法B.薄膜过滤法C.PCR法D.显色法

8.影响培养基渗透压的因素是（）

A.盐浓度B.葡萄糖含量C.血清含量D.pH

9.超净工作台维护要点（）

A.定期更换HEPA滤膜B.检测风速C.避免紫外线直射物品D.保持台面清洁

10.细胞培养基的组成成分包括（）

A.基础培养基B.血清C.抗生素D.NaHCO?

四、判断题（每题2分，共20分）

1.所有细胞培养基都可高压灭菌（×）

2.血清灭活温度为56℃，时间30分钟（√）

3.培养基pH用1mol/LNaOH微调（√）

4.无菌操作时可触碰无菌器材的边缘（×）

5.培养基过滤后应立即分装（√）

6.CO?培养箱浓度需维持5%（√）

7.PBS是细胞培养基的一种（×）

8.含血清培养基可长期冻存（×）

9.无菌检测需培养7天（√）

10.超净工作台使用前需开启风机（√）

五、简答题（每题5分，共20分）

1.简述细胞培养基无菌配制的基本流程

答案：①准备无菌器材（滤器、培养瓶等）；②超净台紫外线消毒20min，开启风机5min；③称量基础培养基、NaHCO?，加双蒸水溶解；④加灭活血清、抗生素；⑤0.22μm滤膜过滤除菌；⑥分装贴标签（名称、日期）；⑦4℃避光储存（含血清）或-20℃冻存（无血清）。

2.血清灭活的注意事项有哪些？

答案：①水浴锅恒温56℃±1℃，避免局部过热；②灭活后立即冰浴降温；③检查血清是否浑浊（浑浊弃用）；④避免反复冻融；⑤灭活后可加抗生素降低污染风险。

3.培养基pH异常的调整方法？

答案：①用1mol/LHCl（降pH）或NaOH（升pH）微调；②校准CO?培养箱浓度；③避免培养基长时间高温暴露；④若污染则弃用，重新配制。

4.无菌检测的结果如何判断？

答案：①直接接种法：10ml培养基接种后37℃培养7天，无浑浊、无菌落为合格；②薄膜过滤法：100ml培养基过滤后培养，无生长为合格；出现浑浊或菌落则不合格。

六、讨论题（每题5分，共10分）

1.如何有效避免培养基配制中的污染？

答案：①环境：超净台定期消毒（紫外线+酒精），实验室通风；②器材：高压/