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课程导航课程目录01质谱基础原理离子化技术、质量分析器工作机制02仪器组成与工作流程系统启动、灌注操作及进样准备03质谱软件操作Masslynx项目管理与方法编辑04方法开发与优化参数调节、定量方法建立技巧05数据采集与处理色谱图解析、质量控制要点06应用案例分享药物代谢、食品安全、临床检测07维护与故障排查日常维护、常见问题解决方案质谱前沿技术

第一章质谱基础原理质谱分析是现代分析化学的核心技术之一。通过将样品分子离子化并测定其质荷比,我们可以获得分子结构、相对分子质量等关键信息。本章将深入探讨质谱技术的基本原理和核心概念。

基础概念质谱分析法简介质谱分析技术通过离子化分子,精确测定质荷比(m/z),从而获得分子的质量信息。该技术能够生成分子离子及碎片离子,为揭示分子结构提供关键线索。高灵敏度可检测痕量级别样品,最低可达飞克级(fg)快速分析单次分析通常在数分钟内完成,适合高通量筛查广泛应用涵盖药物、环境、食品、临床等多个领域

质谱仪的核心组成质谱仪由四个关键系统组成,每个系统在分析过程中扮演着不可或缺的角色。从样品引入到最终信号检测,各部件协同工作,确保数据的准确性和可靠性。进样系统气相色谱、液相色谱或直接进样方式,根据样品性质选择离子源EI、CI、ESI、APCI、MALDI等多种离子化技术质量分析器四极杆、飞行时间、离子阱等不同类型分析器检测器电子倍增器或法拉第杯将离子信号转换为电信号

离子化方式详解离子化是质谱分析的第一步,不同的离子化技术适用于不同类型的样品。选择合适的离子化方式是获得高质量数据的关键。电子轰击(EI)硬电离技术,能量约70eV产生丰富的碎片信息适合小分子挥发性样品谱图库检索标准方法电喷雾(ESI)软电离技术,保留分子离子适合极性和大分子样品可与液相色谱联用广泛用于生物大分子分析大气压化学电离(APCI)适合中等极性样品离子化效率高抗基质干扰能力强常用于药物代谢研究激光解吸(MALDI)适合高分子量生物样品蛋白质、多肽分析首选基质辅助电离质量范围可达数十万道尔顿

质量分析器工作原理1四极杆分析器通过射频(RF)和直流(DC)电压的组合,只允许特定质荷比的离子通过。四根平行杆状电极产生振荡电场,实现质量筛选。2飞行时间(TOF)基于离子在无场漂移区的飞行时间与质量平方根成正比的原理。质量越大,飞行时间越长,分辨率可达数万。3离子阱分析器在三维或二维电场中捕获离子,可进行多级质谱(MSn)分析,特别适合复杂分子的结构解析和碎片研究。

第二章仪器组成与操作流程掌握仪器的正确操作流程是获得可靠数据的基础。本章将详细介绍信立方质谱仪的启动、灌注、进样等关键操作步骤,帮助您建立规范的实验操作习惯。

仪器型号信立方质谱仪主要型号介绍HCLASS/QDa四极杆质谱系统,结构紧凑,操作简便,适合常规定性定量分析。质量范围20-1250Da,灵敏度优异,是入门级用户的理想选择。TripleQuad三重四极杆质谱,定量分析金标准。具有母离子扫描、子离子扫描、中性丢失扫描等多种扫描模式,灵敏度和选择性极高。QTOF高分辨四极杆-飞行时间串联质谱,兼具高分辨率和高质量精度。分辨率可达40000以上,质量精度小于2ppm,适合未知物鉴定和结构解析。

仪器启动与系统灌注正确的启动和灌注流程是保证仪器稳定运行的前提。系统灌注不仅能排除管路中的气泡,还能确保流动相成分均匀,避免基线漂移和重复性差的问题。流动相准备使用HPLC级或质谱级溶剂,通过0.22μm滤膜过滤,超声脱气15-30分钟。检查溶剂瓶液位,确保充足。四元泵灌注在MSConsole中选择Purge功能,设置流速5-10mL/min,灌注每个通道3-5分钟,观察压力稳定后停止。自动进样器灌注灌注进样针和定量环,使用洗针液和样品溶剂分别灌注,确保无气泡残留。检查废液瓶容量,及时清空。系统检查启动数据采集,观察基线稳定性和噪声水平。进行标准品测试,确认灵敏度和峰形正常后方可进行样品分析。

进样前准备流程1样品预处理根据样品性质选择合适的前处理方法。液体样品需离心(10000-13000rpm,5-10分钟),去除颗粒物。固体样品需适当稀释或溶解。2样品过滤使用0.22μm针头滤器或离心滤管过滤样品,防止颗粒堵塞管路和色谱柱。生物样品建议使用蛋白沉淀或固相萃取进一步净化。3流动相配制精确称量或量取溶剂,按比例混合。添加酸、碱或缓冲盐时需充分混匀。流动相应现用现配,避免长时间放置导致变质。4仪器状态检查检查泵压是否正常(通常50-200bar),柱温稳定,检测器响应正常。运行空白样品,确认无记忆效应和污染峰。重要提示:所有与样品接触的器皿应使用质谱级或HPLC级溶剂清洗,避免污染影响分析结果。样品应在4℃保存,分析前恢复至室温。

仪器操作界面介绍