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检验检疫技术赛项技能微生物检验试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

单项选择题（10题，每题1分）

1.下列微生物中，属于革兰氏阳性菌的是（）。

A.大肠杆菌

B.金黄色葡萄球菌

C.沙门氏菌

D.铜绿假单胞菌

2.制备营养琼脂培养基时，灭菌条件通常为（）。

A.121℃、15min

B.115℃、20min

C.100℃、30min

D.131℃、3min

3.进行微生物检验时，无菌操作的关键是（）。

A.快速操作

B.避免微生物污染

C.使用无菌器具

D.以上都是

4.下列培养基中，用于分离大肠杆菌的是（）。

A.麦康凯琼脂

B.沙氏葡萄糖琼脂

C.血琼脂

D.高盐甘露醇琼脂

5.微生物检验中，菌落总数的计数单位是（）。

A.CFU/mL

B.CFU/g

C.CFU/cm2

D.以上都是

6.下列灭菌方法中，适用于玻璃器皿的是（）。

A.巴氏消毒

B.紫外线灭菌

C.干热灭菌

D.过滤除菌

7.革兰氏染色中，媒染剂是（）。

A.结晶紫

B.碘液

C.乙醇

D.番红

8.微生物检验中，平板倒置培养的目的是（）。

A.防止水分蒸发

B.避免冷凝水污染培养基

C.促进菌落生长

D.提高温度

9.下列生化试验中，用于鉴定金黄色葡萄球菌的是（）。

A.氧化酶试验

B.触酶试验

C.吲哚试验

D.硫化氢试验

10.微生物检验报告必须包含的内容是（）。

A.样品名称

B.检验方法

C.结果

D.以上都是

判断题（5题，每题1分）

1.高压蒸汽灭菌后，培养基需立即取出使用，无需冷却。（）

2.平板划线法分离纯化微生物时，每一区划线面积应大于上一区。（）

3.微生物检验报告中，可疑结果需进行复检，不可直接判定。（）

4.培养基制备时，pH调节应在灭菌后进行。（）

5.微生物检验中，无菌操作区域应定期进行消毒处理。（）

简答题（2题，每题15分）

1.简述革兰氏染色法的操作步骤及结果判读标准。

2.若平板培养后出现菌落蔓延（非单菌落），分析可能原因并提出改进措施。

实操技能部分

培养基制备与无菌分装（20分）

考核内容：制备营养琼脂培养基（蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl5g、琼脂15g，加蒸馏水至1000mL），调节pH至7.2-7.4，高压蒸汽灭菌121℃、15min，然后无菌分装至试管，每管5mL。

微生物分离纯化（平板划线）（25分）

考核内容：将含金黄色葡萄球菌的液体样品梯度稀释至10??，使用平板划线法分离纯化微生物，进行四区划线，培养后观察单菌落。

生化鉴定与结果报告（25分）

考核内容：取纯化菌株穿刺接种至葡萄糖发酵管和接触酶试验管，观察结果，根据结果判定菌种，填写检验报告单。

试卷答案

单项选择题

1.答案：B

解析思路：金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性菌，呈紫色；大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌均为革兰氏阴性菌，呈红色。选项A、C、D错误。

2.答案：A

解析思路：营养琼脂培养基常用高压蒸汽灭菌，标准条件为121℃、15min；选项B（115℃、20min）适用于某些耐热物质，选项C（100℃、30min）是巴氏消毒，选项D（131℃、3min）用于特殊灭菌，不符合常规。

3.答案：D

解析思路：无菌操作需综合快速操作、避免污染和使用无菌器具三者，缺一不可；选项A、B、C单独描述均不全面。

4.答案：A

解析思路：麦康凯琼脂选择性抑制革兰氏阳性菌，促进大肠杆菌（革兰氏阴性菌）生长；选项B用于真菌，选项C用于病原菌，选项D用于金黄色葡萄球菌。

5.答案：D

解析思路：菌落总数计数单位取决于样品状态，液体用CFU/mL，固体用CFU/g，表面用CFU/cm2；选项A、B、C均正确，但需根据样品选择。

6.答案：C

解析思路：干热灭菌适用于玻璃器皿（如培养皿），高温干燥；选项A用于食品，选项B用于空气，选项D用于液体。

7.答案：B

解析思路：碘液作