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- 2026-01-26 发布于浙江
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3.2.3胚胎工程(二)——胚胎工程技术及其应用;
应用较多的
胚胎工程技术;
一、体外受精
MⅡ期卵母细胞获能精子
卵巢
精子离心处理新鲜或解
冻的精液
体外受精
受精卵培养;
一、体外受精
产美
卵母细胞采集→MⅡ期卵母细胞获能的精子
体外
受精
受精卵;
二、胚胎移植
1、胚胎移植的概念
胚胎移植:是指将雌性动物体内的早期胚胎或者通过体外受精及其他方式
得到的胚胎,移植到同种的生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。
其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体叫受体”。胚胎移植实际生产胚胎的供体和育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。
在胚胎工程中通过任何一项技术,如转基因、核移植,或体外受精等技术获得
的胚胎,都必须移植给受体才能获得后代。因此,胚胎移植又是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。;
早期胚胎培养
①体外受精
②体内受精
转入目的基
因的受精卵
核移植
胚胎分割;
①胚胎移入的基础;
3、胚胎移植的流程
①对供、受体母牛进行选择,并用激素进行同期发情处理(多种激素,主要是孕激素,配合使用前列腺素和促性腺激素)。对供体母牛的要求是生产和遗传性能优良;对受体母牛的要求
是健康、繁殖能力正常。
②用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。
③超数排卵的母牛发情后,选择同种优秀的公
牛进行配种或人工授精。
④胚胎的收集:配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来 (也叫冲卵)。;
麻醉气囊
冲卵液
子宫颈
胚胎收集;
3、胚胎移植的流程
⑤冲卵后,对胚胎进行质量检查。这时的胚胎应该发育到桑葚胚或囊胚阶段。
⑥将收集的胚胎直接向受体移植或放入-196C°的液氮中保存。
⑦胚胎的移植:
手术法:引出受体子宫和卵巢,将胚胎注入
子宫角,缝合创口。
非手术法:将装有胚胎的移植管送入受体母牛
子宫的相应部位,注入胚胎。
⑧对受体母??进行是否妊娠检查。
⑨受体母牛产下胚胎移植的犊牛。;
非手术法移胚;
4、胚胎移植的现状和意义
进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。在这项
技术中,供体的主要职能变为只生产具有优良遗传特性的胚胎,繁重而漫长的妊娠和育仔的任务由受体取代,这就大大缩短了供体本身的繁殖周期。同时,在对供体实行_超数排卵处理后,可获得多枚胚胎,经移植可得到多个后代,使供体生产下的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。;
胚胎移植
妊娠检查
分娩(胚胎移植的犊牛);
囊胚腔
透明带、
滋养层-
内细胞团
分割针-;
二、胚胎移植
进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的分割针或分割刀,将其移入
盛有操作液的培养皿中,然后,用桑椹胚或囊胚进行分割。对于不同发育阶段
的胚胎,分割的具体操作不完全相同。
囊胚腔
透明带、;
具体操作时,用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的
空透明带中,或直接将裸半胚移植入受体。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
实践证明,采用胚胎分割技术产生同卵多胚的可能性是有限的,到目前为止,最常见的是经分割产生的同卵双胎,而同卵多胎成功的比例都很小。;
取样滋养层
做DNA分析,鉴定性别
已知性别胚胎
二分胚胎胚胎移植
内细胞团;
SRY—PCR胚胎鉴定技术
SRY基因:雄性的性别决定基
因,指Y染色体上具体决定生物雄性性别的基因片段。;
SRY—PCR胚胎的性别鉴定技术
操作的基本程序是:先从被测胚胎中取出几个细胞(一般取滋养层细胞),
提取DNA,然后用位于Y染色体上的性别决定基因,即SRY基因的一段碱基作引物,用胚胎细胞中的DNA为模板,进行PCR扩增(如果胚胎细胞中有SRY基因,则这种PCR可以扩增出大量SRY基因),最后用标记的SRY基因片段作为探针对扩增产物进行检测。出现阳性反应者,胚胎为雄性;出现阴性反应者,胚胎为雌性。这种方法准确率高达90%以上。;
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