2026届高三生物二轮复习课件：简答题规范练　5.生物技术与工程.pptxVIP

大二轮专题复习;;;;;;1.科研团队为了研究番茄抗虫基因(SlJA2)的功能，进行了相关实验。图1为SlJA2基因过表达番茄(OE)构建的过程，图2为SlJA2基因敲除突变番茄(KO)构建的部分过程。

(1)图1中，为保证过程①获得的SlJA2基因与载体正确连接形成重组质粒，需在SlJA2基因上游添加限制酶________的识别序列；在过程____用钙离子可以提高SlJA2基因导入受体细胞的概率。在过程⑤中需通过调整___________________(填激素名称)的比例获得SlJA2基因过表达番茄(OE)。;分析题图，图1中，过程①获得的SlJA2基因为逆转录。由于目的基因必须添加在T－DNA区段，并且位于启动子和终止子之间，不能用NdeⅠ酶切，会把终止子切掉，不能用XhoⅠ酶切，因为下游添加相应限制酶后，会把潮霉素抗性基因切掉。因此为保证获得的SlJA2基因与载体正确连接形成重组质粒，需在目的;(2)图2中，要准确敲除SlJA2基因，需设计正确的向导RNA(sgRNA)，才能准确引导Cas9蛋白切割SlJA2基因。设计sgRNA需要的信息及运用的原理是______________________________________。;(3)科研人员将OE、KO以及未处理(WT)三组番茄进行一系列实验，定期测量相关数据，记录如表(注：“＋”的数目代表程度或数量变化)：;实验组OE组通过增加SlJA2基因的表达量来观察其功能，采用了自变量控制中的加法原理；实验组KO组通过完全抑制SlJA2基因的表达来观察其功能缺失的影响，采用了自变量控制中的减法原理。据表分析，SlJA2基因的表达量与抗虫性、生长速率和产量呈正相关：OE组中SlJA2基因表达量最高，抗虫性、生长速率和产量也最高；KO组中SlJA2基因表达缺失，这些性状均显著下降。由此可知，基因的数量影响基因的表达量；一种基因可以控制多种性状。;2.酵母细胞表达系统是一种利用酵母菌作为宿主来生产重组蛋白的技术平台。土壤中存在产PG酶(增大蛋白质的溶解性)的金黄杆菌，研究人员设计了利用基因工程高效生产PG酶的方案，流程如图1所示，相关限制性内切核酸酶的识别和切割位点如图2所示。回答下列问题：;(1)过程①应用了PCR技术，利用PCR技术扩增时，需要____种引物，引物的作用是_______________________________

_________________。一般还需要往PCR反应缓冲液中加入Mg2＋，??原因是_________________________。PCR反应过程可在PCR扩增仪中自动完成，而后常用_______________来鉴定PCR的产物。;利用PCR技术扩增时，DNA聚合酶不能从DNA链的一端直接开始合成子链，需要在反应体系中添加2种引物，分别与两条模板链结合，使DNA聚合酶能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。DNA聚合酶需要Mg2＋激活，故一般还需要往PCR反应缓冲液中加入适量的Mg2＋。PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，PCR的产物的分子量大小等不同，常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物。;(2)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K质粒重组，据图分析，该过程中最好选择限制酶______________切割。;过程②是将目的基因导入受体细胞的过程，在此之前需要先构建基因表达载体，即将PG酶基因与pPIC9K质粒重组。在构建基因表达载体时，需要用同一种限制酶或能产生相同末端的限制酶分别切割质粒和目的基因，根据图1和图2分析，PG酶基因两端序列分别含有BglⅡ和NotⅠ识别序列，故最好选择限制酶BglⅡ和NotⅠ切割能产生和目的基因相同的末端。;(3)结合图中过程③分析，将重组质粒导入大肠杆菌内的目的是_______________

______________________________________________。过程④中将重组质粒酶切后，整合在酵母菌染色体上。;3.重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子(图中黑色正方形代表替换的碱基)，并将改造后的目的基因导入质粒构建目的基因表达载体。回答下列问题：;(1)图中所示的重叠延伸PCR技术中，PCR1的引物是_____________。PCR4可获得大量定点诱变目的基因，此时的引物为______________。PCR3时模板DNA不能选择DNA分子③的原因是______________________________________

_______________________________。;由于DNA合成