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上一内容下一内容回主目录返回色谱分析平面色谱法演示文稿现在是1页\一共有28页\编辑于星期日（优选）色谱分析平面色谱法现在是2页\一共有28页\编辑于星期日Thin-layerchromatographyofstandardPLsamplesFig.1Description:Thethermo-stabilityofphospholipidsandlysophospholipidswasdeterminedbyonedimensionalthin-layerchromatography(TLC).Achloroform-methanol-28%aqueousammoniasolventsystem(65:35:8,v/v)providedclearseparationofmajorphospholipids(PL)andtheirlysoforms.The5%(w/v)dodecamolybdophosphoricacidsolutioninethanolwasusedassprayreagent.ThethermostabilityofphospholipidswasevaluatedbycomparethespotsdensityandareaofPLsampleswithvaryingheattreatment.Rapiddeterminationofthermo-stabilityofphospholipidsbyTLC现在是3页\一共有28页\编辑于星期日第五章平面色谱法定义：平面色谱法(planechromatography)是在平面上进行分离的一种色谱方法。一、平面色谱法的分类和原理分类纸色谱法：滤纸为载体，纤维素的羟基与水结合形成液-液分配色谱固定相，展开剂由于毛细作用沿滤纸向上运动。---分配色谱薄层色谱法：将吸附材料均匀固定在载板上，由于吸附剂颗粒间的毛细作用，展开剂（流动相）上行。-----吸附色谱薄层电泳法：荷电组分样品负载于惰性支持介质（纸、纤维素、聚丙烯酰胺凝胶等），在电场作用下进行分离。现在是4页\一共有28页\编辑于星期日二、平面色谱法的基本流程确定样品的预处理方法选择吸附剂和展开剂制备层析用薄板点样层析分离显色定性或定量分析分析结果，给出结论现在是5页\一共有28页\编辑于星期日三、平面色谱法参数（一）定性参数1.比移值Rf(retardationfactor;Rf)溶质移动的距离与流动相移动距离之比Rf范围：0Rf1Rf=0.2~0.8（常用）Rf=0.3~0.5（最佳）现在是6页\一共有28页\编辑于星期日Lds1ds2图18－1现在是7页\一共有28页\编辑于星期日2.相对比移值Ris讨论参考物与被测组分在完全相同条件下展开可以消除系统误差，大大提高重现性和可靠性；参考物可以是后加入纯物质，也可是样品中已知组分相对比移值Ris与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围可以大于或小于1现在是8页\一共有28页\编辑于星期日（二）面效参数1、理论塔板数N=16(ds/W)2ds:原点到斑点中心的距离W：组分斑点的纵向宽度2、塔板高度H=ds/N=(RfL)/Nds：原点到展开剂前沿的距离N越大，H越小。与展开剂的速率常数、组分在展开剂中的扩散系数、吸附剂的平均粒径及其粒度分布等因素有关。现在是9页\一共有28页\编辑于星期日（三）容量因子k’与比移值Rf的关系容量因子：k’=ts/tmts、tm分别为组分在固定相和展开剂中的保留时间保留值的定义：现在是10页\一共有28页\编辑于星期日（四）分离参数1、分离度(resolution;R)两相邻斑点中心的距离与两斑点平均宽度的比值R=2(ds2-ds1)/(W1+W2)=2d/(W1+W2)ds1、ds2:分别为原点至两半斑点中心的距离，W1、W2斑点的宽度。现在是11页\一共有28页\编辑于星期日2.分离数(separationnumber;SN)定义：相邻斑点分离度为1.177时，在Rf=0(原点)到Rf=1(溶剂前沿)之间能容纳的色谱斑点