基于数字PCR的EGFR基因L858R突变丰度参考测量程序.docxVIP

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《基于数字PCR的EGFR基因L858R突变丰度参考测量程序》标准立项与发展报告

EnglishTitle:DevelopmentReportontheStandardizationProject:ReferenceMeasurementProcedureforEpidermalGrowthFactorReceptor(EGFR)GeneMutationAbundanceBasedonDigitalPCR—Part2:Exon21PointMutationL858R

摘要

本报告旨在系统阐述国家标准《基于数字PCR的表皮生长因子受体（EGFR）基因突变丰度参考测量程序第2部分：外显子21点突变L858R》的立项背景、核心内容、技术价值及行业影响。肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占主导。EGFR基因突变，尤其是外显子21L858R点突变，是东亚NSCLC患者最重要的驱动基因突变之一，其精准检测是指导靶向药物（EGFR-TKI）临床应用、实现个体化医疗的基石。然而，临床检测中不同平台、试剂和方法间结果的可比性与准确性存在挑战，亟需建立高等级、可溯源的参考测量程序。数字PCR技术因其绝对定量、高灵敏度、高特异性等优势，成为建立参考方法的理想选择。本标准的制定，基于中国计量科学研究院已获国际认可的成熟技术，旨在为EGFRL858R突变丰度检测提供一套科学、规范、统一的参考测量程序。其实施将有力提升我国肿瘤基因检测结果的准确性与实验室间可比性，支撑精准医疗质量体系建设，为癌症防治行动提供关键的技术标准保障，具有重大的临床意义和社会价值。

关键词：

表皮生长因子受体；EGFR；L858R；数字PCR；参考测量程序；标准化；精准医疗；非小细胞肺癌

Keywords:

EpidermalGrowthFactorReceptor;EGFR;L858R;DigitalPCR;ReferenceMeasurementProcedure;Standardization;PrecisionMedicine;Non-SmallCellLungCancer(NSCLC)

正文

一、立项背景与目的意义

恶性肿瘤是严重威胁我国居民健康的重大公共卫生问题。根据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球癌症负担数据，中国新发癌症病例与死亡人数均位居全球第一。数据显示，2020年中国新发癌症病例约457万例，至2022年已上升至约482万例，防控形势严峻。为此，国家《健康中国行动—癌症防治行动实施方案（2023—2030年）》明确提出，需加强癌症预防、筛查、早诊早治和科研攻关，在防治技术等关键环节取得突破。

在肺癌领域，非小细胞肺癌（NSCLC）约占所有肺癌的85%。表皮生长因子受体（EGFR）基因突变是东亚NSCLC人群中最常见的驱动基因突变，发生率高达30%～40%。根据《中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识（2016版）》，EGFR敏感突变主要包括外显子19缺失突变（19del）和外显子21点突变（L858R），两者合计占所有EGFR突变的近90%。检测患者组织或液体活检样本中的EGFR突变状态，是筛选适合接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）靶向治疗患者的决定性步骤，直接关系到治疗效果与患者生存预后。

随着精准医疗的深入，临床对基因突变检测的准确性、灵敏度及定量能力提出了更高要求。数字PCR（dPCR）作为第三代PCR技术，通过将反应体系分割成数万个微反应单元，实现终点信号的“有”或“无”的判读，从而不依赖于标准曲线即可对靶分子进行绝对定量。相较于传统的实时荧光定量PCR（qPCR），dPCR具有更高的灵敏度、特异性以及对抑制剂的更强耐受性，特别适用于低丰度突变检测和复杂背景下的精准定量，在肿瘤基因检测领域展现出巨大潜力。

然而，目前市场上EGFR检测方法多样，包括qPCR、高通量测序（NGS）、dPCR等，不同实验室、不同检测平台之间的结果可能存在差异，影响临床决策的一致性和治疗方案的优化。建立国家级的、可溯源的参考测量程序，是解决这一问题的根本途径。中国计量科学研究院在此领域已开展前瞻性研究，其建立的针对EGFR19del、L858R及T790M突变的数字PCR参考测量方法，因其高准确度和可靠性，已被收录于国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）数据库，获得了国际同行的认可。

因此，基于坚实的前期科研基础和迫切的临床需求，立项制定《基于数字PCR的EGFR基因突变丰度参考测量程序》系列国家标准具有深远意义。本部分（第2部分：L858R）作为该系列标准的重要组成