《玉米孢囊线虫鉴定和监测技术规程》(DB41T 3053-2025).docxVIP

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  • 2026-02-05 发布于河南
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《玉米孢囊线虫鉴定和监测技术规程》(DB41T 3053-2025).docx

ICS65.020.01CCSB16

41

河南省地方标准

DB41/T3053—2025

玉米孢囊线虫鉴定和监测技术规程

2025-12-04发布2026-03-03实施

河南省市场监督管理局发布

DB41/T3053—2025

I

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4试剂和设备 1

5鉴定方法 2

6监测方法 2

7调查记录 3

附录A(资料性)玉米孢囊线虫危害症状和形态学特征 4

附录B(资料性)酸性品红染色方法 6

附录C(规范性)玉米孢囊线虫系统调查表 7

DB41/T3053—2025

II

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由河南省农业农村厅提出。

本文件由河南省植物保护标准化技术委员会(HN/TC32)归口。

本文件起草单位:河南农业大学、河南省植物保护检疫站、中国农业科学院植物保护研究所。

本文件主要起草人:崔江宽、汤继华、彭红、李好海、彭德良、焦永吉、陈锋、彭焕、安世恒、蒋士君、孙炳剑、周扬、孟颢光、张雪海。

DB41/T3053—2025

1

玉米孢囊线虫鉴定和监测技术规程

1范围

本文件规定了玉米孢囊线虫鉴定和监测的试剂和设备、鉴定方法、监测方法、调查记录等内容。本文件适用于玉米孢囊线虫的鉴定和监测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

SN/T

SN/T

NY/T

1848

2757

3533

植物有害生物鉴定规范

植物线虫检测规范

小麦孢囊线虫鉴定和监测技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

玉米孢囊线虫

玉米孢囊线虫(Heteroderazeae)属于垫刃亚目异皮科异皮属,主要危害玉米等多种禾本科作物和杂草的一类世界性重要植物寄生线虫。

阴门锥

位于孢囊尾部,包含会阴部及其有关内部结构,是孢囊线虫分类和鉴定的重要依据。

严重度

表示植株根系感染玉米孢囊线虫病的严重程度。严重度用分级法表示,一般根据玉米大喇叭口期根部白雌虫数量将严重度分为0~4级。

4试剂和设备

主要试剂

高岭土、蔗糖、酸性品红、TAF固定液、加拿大树胶、玉米孢囊线虫SCAR-PCR引物、rTaq酶、PCR扩增试剂盒等。

主要设备

20目、100目和500目标准筛网,体视显微镜(10~100倍)和生物显微镜(40~1000倍),台式低速离心机(最大转速6000r/min),常规PCR仪、电泳仪和凝胶成像仪。

2

DB41/T3053—2025

5鉴定方法

5.1样品采集

观察玉米等作物地上部是否出现黄化、矮化,叶色暗淡,叶边缘焦黄等症状;根部是否有晶莹的白色粒状物,根系生长发育不良。(危害症状参见附录A)。采集有上述症状,生长异常的植株根系和根际土壤样品带回实验室,进行室内线虫种类鉴定。

5.2形态学鉴定

5.2.1孢囊和二龄幼虫分离

样品中孢囊的分离采用蔗糖简易离心法,二龄幼虫的分离采用浅盘法。分离方法参考NY/T3533的处理方法。

5.2.2拍照测量

参照SN/T2757的方法制作玻片,在体视显微镜下观察孢囊、二龄幼虫、雌虫和雄虫等玉米孢囊线虫不同虫态的形态特征,拍照,并在每张图上加对应比例尺。

5.2.3鉴定依据

以孢囊和雌虫的形态学特征作为玉米孢囊线虫鉴定的主要依据,二龄幼虫和雄虫作为鉴定的辅助依据。具体描述详见附录A。

5.3分子生物学鉴定

将分离获得的孢囊和二龄幼虫,进行SCAR-PCR检测,根据凝胶电泳特异性条带结果进行玉米孢囊线虫的辅助鉴定。

5.4结果判定

参照SN/T1848鉴定规范,依据形态学鉴定和分子生物学鉴定的结果判定是否为玉米孢囊线虫。

6监测方法

6.1系统调查

参照SN/T1848和SN/T2757规范,系统调查玉米孢囊线虫的田间孢囊数量、卵量、白雌虫和发育进度。

6.2调查点设定

选择代表性的玉米田2~3块,每块不少于1亩,作为玉米孢囊线虫病系统调查固定监测点。宜设立监

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