DB53_T 1340-2025香石竹品种真实性鉴定+SNP分子标记法.pdfVIP

ICS65.020

CCSB62

5

云南省地方标准

查石竹品种具实性鉴定SNP分千标记法

2025-01-08发布

云南省市场临管理后发布

前言

起草

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的香仟

本文件由云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所提出

本文件由云南省农业标准委员会(YNTC07)归口

本文件负责起草单位:云南省农业科学院质量标准与检测技术研究所、昭通学院、云南省种子管到

站、综纷园艺(中国)有限公司、成都潮辰光翼科技有限责任公司

本立件主要起苴人,故本、刘换劳、干世街、汤墨、江任飞、乔蓿香、妹宗淫、能影珍、杨感混

刘天平、杨架洁、毛进。

香石竹品种真实性鉴定SNP分子标记法

1范

本文件适用于香石竹品种的真实性签定

2规范性引用文件

下列文件中的内答通过文中的规绝性引用而构成本文件必个可少的杀款。其中,汪日期的引用文件

仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于

文件。

(B/T6682分析实验至用水观格和试验万江

3木和正义

本文件没有需要界定的术语和定义,

4名

下列缩略语适用于本文件,

CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammoniumbromide

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

DTA:乙二胶四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid

PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction

SNP:单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism

7aq:耐热DNA聚合酶(TagDNApolymerase)

TE:三经甲基氮基甲烷-乙二胺四乙酸(Tris-EDTA)

5定准备

5,1仪辞设备

仪器设备有电泳仪、电泳精及配套的制胶附件、水平电泳精及配套的制胶附件、高速冷冻离心机(

检测的仪器设备、低温冰稻等。

5试

DB53//T1340—2025

5.2.1除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和B/T6682规定的一级水

9003-39-81。

5.3DMA提取液

5.3.10.5mo1.L”E0TA溶活

称取186.1g乙二胶四乙酸二钠溶于

高压灭菌2Omin。部

5.3.21.0mo1.LTris-HC1溶液

称取60,6g三经甲基氨基甲烷阳HC[i词pH至8.O1加水定容至500m,121,0℃

路oo

高压灭雨20.0min。

5.3.3CTAB捉E取液

5331海于的700,0mL水中,

分别称双20.0gC化

5.3.3.2加入100,0mL1.0m溶4晶落液,加水定容至1000.C

mL。

121,0℃高压灭菌后如入yo匀备用。

5.3.3.3

5.3.3.4也可使用商品CTAB

5。34E编冲液地范酝准

分别量取5.0mL浓度1.0mmo1L”的EπA溶液,加水定

迎我

容至500,0m,121,0℃高压灭

5.4KASP引物工作液

5.4,1KASP引物溶液出

至00.0μmo1L作为工作液备用

将附录A所示每个位点的三管引物干耕金别用超纯水溶解

5.4.22×KASPMasterMix试剂

6操作流程

6.1样品准备