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合成生物基因治疗载体工程师岗位招聘考试试卷及答案

填空题（每题1分，共10分）

1.基因治疗中常用的非整合型病毒载体是______

2.阳离子脂质体与DNA结合形成的复合物称为______

3.载体构建的核心步骤包括酶切、连接和______

4.腺病毒载体通常缺失______基因以降低致病性

5.CRISPR-Cas9系统常用的递送载体是______

6.非病毒载体中聚合物PEI的主要优势是______

7.载体靶向性修饰常通过添加______实现

8.慢病毒载体可整合到宿主细胞的______中

9.载体纯化常用方法包括超速离心和______

10.基因治疗载体安全性评估需检测______

答案

1.腺相关病毒（AAV）

2.脂质-DNA复合物（LPD）

3.转化/转染

4.E1

5.AAV/慢病毒

6.可修饰性强

7.特异性配体

8.基因组

9.层析法

10.插入突变风险

单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下属于非整合型病毒载体的是？

A.慢病毒B.腺病毒C.逆转录病毒D.整合酶缺陷型慢病毒

2.阳离子脂质体的主要作用是？

A.扩增DNAB.切割DNAC.压缩DNA促摄取D.整合基因

3.载体构建中限制酶的功能是？

A.连接片段B.切割特定序列C.修饰末端D.扩增DNA

4.常用于体内基因递送的载体是？

A.大肠杆菌质粒B.AAVC.噬菌体D.酵母载体

5.慢病毒载体可感染的细胞类型是？

A.仅分裂细胞B.仅非分裂细胞C.分裂+非分裂细胞D.仅原核细胞

6.载体靶向修饰不包括？

A.肽段修饰B.抗体片段修饰C.多糖修饰D.核酸随机修饰

7.慢病毒包装细胞需表达的蛋白是？

A.Gag/Pol/EnvB.Cas9/gRNAC.荧光蛋白D.细胞因子

8.降低载体递送效率的因素是？

A.血清稳定B.细胞摄取障碍C.靶向配体D.核定位信号

9.基因治疗载体临床前常用动物模型不包括？

A.小鼠B.大鼠C.非人灵长类D.大肠杆菌

10.可用于瞬时表达的载体是？

A.腺病毒B.慢病毒C.逆转录病毒D.整合型AAV

答案

1.B2.C3.B4.B5.C6.D7.A8.B9.D10.A

多项选择题（每题2分，共20分，多选/少选不得分）

1.常用病毒载体包括？

A.AAVB.慢病毒C.腺病毒D.噬菌体

2.非病毒载体优势是？

A.无免疫原性B.容量大C.易制备D.整合风险低

3.载体构建关键工具酶是？

A.限制酶B.DNA连接酶C.Taq酶D.逆转录酶

4.载体安全性评估指标包括？

A.插入突变B.免疫反应C.毒性D.递送效率

5.慢病毒载体特点是？

A.基因组整合B.感染分裂+非分裂细胞C.容量≤10kbD.免疫原性低

6.阳离子脂质体组成包括？

A.阳离子脂质B.中性脂质C.胆固醇D.核酸

7.载体靶向策略包括？

A.表面配体B.核定位信号C.组织特异性启动子D.增强子

8.载体纯化方法有？

A.超速离心B.离子交换层析C.亲和层析D.电泳

9.载体应用领域包括？

A.遗传性疾病B.肿瘤C.感染性疾病D.再生医学

10.影响AAV递送效率的因素是？

A.血清型B.剂量C.给药途径D.宿主免疫

答案

1.ABC2.BCD3.AB4.ABC5.ABD6.ABC7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD

判断题（每题2分，共20分，对√错×）

1.腺病毒载体可整合到宿主基因组（×）

2.非病毒载体免疫原性比病毒载体低（√）

3.慢病毒仅感染分裂细胞（×）

4.AAV载体容量约4.7kb（√）

5.阳离子脂质体毒性比聚合物低（×）

6.平末端连接比粘性末端效率高（×）

7.载体靶向仅依赖表面配体（×）

8.慢病毒包装需辅助质粒（√）

9.腺病毒免疫原性低（×）

10.非病毒载体可体内外递送（√）

简答题（每题5分，共20分）

1.简述AAV载体的主要优势。

答案：AAV是基因治疗常用载体，优势为：①免疫原性低，不易引发强烈免疫反应；②可感染分裂/非分裂细胞，适用范围广；③血清型多样（如AAV9靶向中枢神经），可组织特异性递送；④容量适中（4.7kb），满足多数治疗基因需求；⑤无致病性，安全性已在临床验证。

2.非病毒载体与病毒载体的核心区别？

答案：①来源：病毒载体为改造天然病毒，非病毒为人工合成（脂质体、聚合物）；②整合性：多数病毒可整合，非病毒多瞬时表达；③免疫原性：病毒高，非病毒低；④容量：非病毒容量大（可携大片段），病毒有限；⑤制备：非病毒易规模化，病毒需复杂包装；⑥安全性：非病毒整合风险低，病毒需关注插入突变。

3.载体构建的基本流程？

答案：①获取目的基因（PCR/合成）；②酶切载体与目的基因（产生互补末端）；③T4连接酶连接重组载体；④转化感受态大肠杆菌；⑤抗性筛选+PCR/酶切验证重组质粒；⑥纯化重组质粒，用于后续转染/