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细胞因子正确储存条件全解析——从原理到实操的科研级指南

细胞因子作为生物医学研究与生物医药开发的“分子工具”，其活性稳定性直接决定实验结果的可靠性与药物开发的成功率。然而，因细胞因子自身的生物学特性，不当储存往往导致其空间结构破坏、活性丧失。

一、先懂原理：细胞因子为什么“娇贵”？

细胞因子是由免疫细胞或非免疫细胞分泌的小分子蛋白质/多肽，其生物活性依赖精确的空间构象。这种结构对环境变化异常敏感：

-温度敏感性：高温会破坏氢键与疏水相互作用，导致蛋白质变性；低温虽能抑制降解，但反复冻融会产生冰晶，物理性撕裂分子结构。

-酶敏感性：细胞因子易被蛋白酶降解，即使极低浓度的酶也会快速降低其活性。

-pH敏感性：过酸或过碱环境会改变氨基酸残基的电荷状态，破坏分子折叠。

简言之，细胞因子的储存核心是“抑制一切可能破坏空间构象的因素”。

二、实操指南：细胞因子正确储存的5大关键条件

1.温度控制：分“短期”与“长期”精准选择

长期储存（＞1个月）：优先选择-80℃超低温冰箱。

短期储存（＜1个月）：可放于-20℃冰箱，但需注意：①避免放在冰箱门架；②用密封袋包裹。

临时使用：解冻后的细胞因子需在4℃冰箱中保存，且24小时内用完——超过时间的剩余试剂应丢弃，不可复冻。

2.冻融操作：“快速化冻+避免反复”是核心

反复冻融是细胞因子活性损失的“第一杀手”。正确操作：

-解冻时，将冻存管放入37℃水浴锅，快速摇晃至完全融化；

-如需分批次使用，应在首次解冻后立即分装，再放回-80℃储存。

3.缓冲体系：选对溶剂比“低温”更重要

细胞因子的储存液需满足等渗、pH稳定的要求，常见选择：

-磷酸盐缓冲液（PBS）：最常用，pH7.2-7.4，与人体体液渗透压一致，适合大多数细胞因子；

-含血清的培养基：如10%FBS的DMEM，可通过血清中的蛋白“保护”细胞因子，但需注意血清批次差异可能影响实验重复性；

-特殊缓冲液：对pH敏感的细胞因子，需用HEPES缓冲液，其缓冲能力更强。

注意：禁止用蒸馏水直接溶解细胞因子——低渗环境会导致蛋白质分子膨胀破裂。

4.防污染：无菌+无酶是底线

细胞因子溶液一旦被微生物或蛋白酶污染，活性会在几小时内丧失。操作要点：

-所有接触细胞因子的容器需为无酶、无热源；

-溶解与分装时，在超净工作台中进行，避免空气中的微生物落入；

-储存液中可添加0.1%叠氮钠，但需确认其对实验无干扰。

5.避光：光敏性细胞因子的“隐形保护”

部分细胞因子含有色氨酸残基，易被紫外线或可见光破坏。这类试剂需：

-用棕色冻存管储存；

-存放于冰箱的避光层（如冰箱内部靠后的位置，避免开门时的光线直射）。

三、科研人员最易踩的3个误区

“-20℃冰箱够冷了”：错！-20℃冰箱的温度波动（±5℃）会导致细胞因子反复“微冻融”，长期储存仍会失活；

“解冻后放4℃能存一周”：错！即使4℃，蛋白酶仍有活性，24小时后活性会下降30%以上；

“用普通离心管就行”：错！普通塑料离心管可能释放塑化剂，破坏细胞因子结构——必须用无酶、低吸附的EP管。

四、稳定储存的“最后一公里”：选对供应商很关键

细胞因子的储存稳定性，不仅依赖实验室操作，更取决于试剂本身的纯度与制备工艺。例如，高纯度（＞98%）的细胞因子因杂质少，更耐储存；而含白蛋白（BSA）的载体蛋白配方，能通过“空间位阻”减少分子间聚集，延长活性保质期。

在细胞及试剂领域，尚恩生物作为武汉东湖高新区的国家高新技术企业，依托光谷生物城的产业生态，构建了覆盖细胞、培养基、血清及细胞因子的全链条产品体系。其细胞因子产品采用“超纯表达+载体蛋白保护”工艺，出厂前通过HPLC纯度检测与生物活性验证，并提供定制化储存建议——针对科研客户的不同实验需求，可调整缓冲液配方与分装规格，从源头降低储存风险。