CN111374055A 一种翅果油树人工种子的制作方法 （西安艾默农林生物技术有限公司）.docxVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN111374055A

(43)申请公布日2020.07.07

(21)申请号202010293161.X

(22)申请日2020.04.15

(71)申请人西安艾默农林生物技术有限公司地址710086陕西省西安市沣东新城协同

创新港银河A座5层

(72)发明人王小帆史玮王超

(51)Int.CI.

A01H4/00(2006.01)

权利要求书2页说明书7页

(54)发明名称

一种翅果油树人工种子的制作方法

(57)摘要

CN111374055A本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种翅果油树人工种子的制作方法，具体按照以下步骤实施：步骤1,外植体的采集及消毒灭菌处理；步骤2,外植体的接种，得到愈伤组织；步骤3,将步骤2所得的愈伤组织接种到诱导愈伤组织的再分化培养基中，诱导形成胚状体；步骤4,在预先配制的0.2～0.3mol/L的氯化钙中加入0.3%多菌灵粉剂，再加入0.1mg/L青霉素；在预先配制的3%～4%的海藻酸钠中加入1.8~2.0mg/L的IBA和7～9mg/L的NAA;将步骤3所得胚状体剪碎，得到人工种胚；步骤5,采用水凝胶法包埋人工种子。通过在一定浓度及环境的培养基

CN111374055A

CN111374055A权利要求书1/2页

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1.一种翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：具体按照以下步骤实施：

步骤1,外植体的采集及处理，采集翅果油树的当年生幼叶或幼芽，将叶片与茎分离，对叶片进行消毒灭菌；

步骤2,外植体的接种，消毒灭菌后的叶片接种至预配制的培养基中培养，得到愈伤组织；

步骤3,愈伤组织的再分化，将步骤2所得的愈伤组织接种到诱导愈伤组织的再分化培养基中，诱导形成胚状体；

步骤4,人工种子包埋前的准备工作；

在预先配制的0.2～0.3mol/L的氯化钙中加入0.2～0.3%多菌灵粉剂，再加入0.1~0.2mg/L青霉素，获取氯化钙水溶液；

在预先配制的3%～4%的海藻酸钠中加入1.8～2.0mg/L的IBA和7～9mg/L的NAA,获取半凝胶状态的海藻酸钠溶液；

所述人工种胚的制备，将步骤3所得胚状体剪碎，得到人工种胚；

步骤5,人工种子的包埋，采用水凝胶法包埋人工种子。

2.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤1中，对采集的翅果油树的当年生幼叶或幼芽进行处理，按照以下步骤进行消毒灭菌处理：

步骤1.1,将外植体使用酒精浸泡；

步骤1.2,浸泡后的外植体再使用无菌水冲洗；

步骤1.3,使用0.1%升汞溶液浸泡冲洗外植体；

步骤1.4,升汞浸泡消毒完成后，在超净工作台上使用无菌水冲洗。

3.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤2中培养基为添加有琼脂与蔗糖的MS培养基，培养基成分为MS+0.6～1.0mg/L6-BA+0.08~0.1mg/LNAA。

4.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤2中外植体接种至培养基中，光照条件为：前期为暗培养，后期光照为12-14h/天、光照强度为1500-20001x。

5.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤2中外植体接种至培养基中的培养温度，及步骤3中愈伤组织在愈伤组织再分化培养基中的培养温度均为25±2℃。

6.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤3中诱导愈伤组织的再分化培养基成分为：MS+0.7～0.9mg/L6-BA+0.03～0.07mg/LIBA。

7.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤3愈伤组织的再分化，光照条件为：15～17h/天、光照强度为2000-30001x。

8.根据权利要求1所述的翅果油树人工种子的制作方法，其特征在于：所述步骤4人工种子包埋前的准备工作，具体按照以下步骤实施：

步骤4.1,配制3%～4%的海藻酸钠和0.2～0.3mol/L的氯化钙；

步骤4.2,配制1.8～2.0mg/L的IBA、7～9mg/L的NAA、0.1～0.2mg/L的青霉素及0.2~0.3%的多菌灵粉剂；

步骤4.3,在配制完成的0.2～0.3mol/L的氯化钙中加入0.2～0.3%多菌灵粉剂，再加

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