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基于硝酸纤维素膜的电化学免疫传感器：己烯雌酚快速检测的创新突破

一、引言

1.1己烯雌酚概述

己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）是一种人工合成的非甾体雌激素，其化学名为(E)-4,4-(1,2-二乙基-1,2-亚乙烯基)双苯酚，分子式为C_{18}H_{20}O_{2}，分子量为268.36。在生物体内，己烯雌酚具有广泛的生理作用，小剂量时，它能够刺激垂体前叶促性腺激素的分泌，对生殖系统的正常发育和功能维持有着重要意义。在女性生殖系统中，它可以促进子宫内膜的增生，为受精卵的着床提供适宜的环境，同时也参与调节卵巢中卵泡的发育和排卵过程。从分子层面来看，己烯雌酚的结构与天然雌激素相似，能够与雌激素受体结合，形成稳定的复合物，进而激活一系列下游信号通路，调控相关基因的表达，发挥其生物学效应。

然而，当己烯雌酚过量时，却会对人体健康产生严重的负面影响。它可能导致人体内分泌系统的紊乱，干扰正常的激素平衡。对于女性，过量的己烯雌酚可能引发乳腺增生，使乳腺组织异常增殖，增加患乳腺癌的风险；还可能导致子宫内膜过度增生，提高子宫内膜癌的发病几率。在男性中，过量摄入己烯雌酚会导致体内雌激素水平相对过高，从而出现乳房发育、乳头疼痛等女性化症状，还可能引发性功能障碍，如性欲减退、勃起功能减弱等。长期或过量接触己烯雌酚还可能对肝脏造成损害，加重肝脏的代谢负担，导致肝功能异常，严重时甚至可能引发肝炎或肝硬化等疾病。

鉴于己烯雌酚对人体健康的潜在危害，准确检测其在环境、食品以及生物样品中的含量显得尤为必要。通过有效的检测手段，能够及时发现己烯雌酚的污染情况，为保障食品安全、环境安全以及人体健康提供有力的数据支持。在食品安全领域，严格检测食品中的己烯雌酚残留，可以防止消费者摄入受污染的食品，避免健康受到威胁。在环境监测方面，检测水体、土壤等环境介质中的己烯雌酚含量，有助于评估其对生态系统的潜在影响，及时采取相应的治理措施，保护生态平衡。

1.2己烯雌酚检测现状

1.2.1传统检测方法

目前，针对己烯雌酚的检测，传统方法主要包括高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS）、放射免疫法（RIA）、酶联免疫法（EIA）等。

高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS）是一种将高效液相色谱的高分离能力与质谱的高灵敏度和结构鉴定能力相结合的分析技术。在己烯雌酚的检测中，首先通过高效液相色谱柱对样品中的各种成分进行分离，然后将分离后的己烯雌酚引入质谱仪中。质谱仪通过对己烯雌酚分子进行离子化，并根据其质荷比的不同进行检测和分析，从而实现对己烯雌酚的定性和定量测定。该方法具有分离效率高、灵敏度高、能够同时对多种化合物进行分析等优点，能够准确地检测出极低浓度的己烯雌酚，检测限可达10^{-9}级别。然而，HPLC-MS设备价格昂贵，通常需要数百万的资金投入，维护成本也较高，需要专业的技术人员进行操作和维护。其分析过程较为复杂，样品前处理步骤繁琐，需要进行提取、净化等多个环节，分析时间较长，每次检测可能需要数小时甚至更长时间，难以满足快速检测的需求，不适用于现场检测。

放射免疫法（RIA）是利用同位素标记的与未标记的抗原同抗体发生竞争性抑制反应的放射性同位素体外微量分析方法。在己烯雌酚的检测中，将放射性同位素标记的己烯雌酚与样品中的己烯雌酚共同竞争有限的抗体结合位点。通过检测结合或游离标记物的放射性强度，间接推测样品中己烯雌酚的含量。该方法特异性强，能够准确地识别己烯雌酚分子，灵敏度高，已达到pg/mL水平。但是，RIA需要有专门的同位素防护设备，以确保操作人员和环境的安全，这增加了检测成本和操作难度。仪器价格昂贵，测定程序比较繁琐和费时，每次检测都需要进行复杂的放射性计数和数据分析，而且同位素的半衰期有限，需要定期更换，进一步增加了检测成本和管理难度。由于抗体的特异性较差，分析前需要进行抽提和纯化步骤，以减少假阳性结果，这也增加了检测的复杂性和时间成本。

酶联免疫法（EIA）是继RIA后发展起来的一种非同位素免疫检测技术，它将酶促反应的高效性与免疫反应的高度专一性有机结合。在己烯雌酚的检测中，将己烯雌酚抗原包被在微孔板上，样品中的己烯雌酚与包被抗原竞争结合特异性抗体，然后加入酶标记的二抗，通过酶催化底物显色，根据颜色的深浅来判断样品中己烯雌酚的含量。该方法灵敏度高，操作相对安全，不需要昂贵的仪器设备，可以满足大批量快速测定的需求，市场上也有多家公司的己烯雌酚ELISA试剂盒销售。然而，EIA的结果不太稳定，容易受到样品基质、操作过程等因素的影响，假阳性率较高。其检测结果的准确性和重复性相对较差，不同批次的试剂盒之间可能存在一定的差异，影响检测结果的可靠性。

1.2.2新型检测技术的需求

尽管传统的己烯雌