高效液相色谱法检测葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体.pdfVIP

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高效液相色谱法检测葡萄酒中白藜芦醇及其糖苷异构体.pdf

现代仪器(www.moderninstrs.org.cn)

高效液相色谱法检测葡萄酒中的白藜芦醇及其糖苷异构体

吴迪穆怡然刘志华郭玲玲俞然吕宪禹

(1.南开大学生命科学学院天津300071)

(2.河北工业大学化工学院天津300130)

(3.天津医科大学医学影像学系天津300203)

(4.中法合营王朝葡萄酿酒有限公司天津300402)

摘要白藜芦醇是一类具有保健作用的生物活性物质。本文采用高效液相色谱法同时

检测葡萄酒中反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷和顺式白藜芦醇苷4种化

合物。方法准确、快捷。

关键词高效液相色谱白藜芦醇葡萄酒

白藜芦醇是一类在多种植物中存在的天然有机2结果与讨论

化合物,多以单体和其糖苷形式存在,每一种形式

2.1转化波长的选择

又存在顺、反两种异构体,故一般有4种存在形式:

白藜芦醇及其糖苷的顺式异构体不稳定,没有

顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇苷和

商品化标样出售。反式样品在紫外线照射下几乎能

反式白藜芦醇苷]。白藜芦醇及其糖苷异构体是生

够等摩尔转化为顺式样品4【】,所以将反式标样溶液

物活性物质,对人体具有保健作用口’。

置于紫外线下照射,以产生顺式异构体用于实验。

较其他植物和植物产品,葡萄和葡萄酒中含有

配制浓度分别为100mg/L的反式白藜芦醇和

较高水平的白藜芦醇。我们利用反相高效液相色谱,

反式白藜芦醇苷溶液,在其他条件不变的前提下,

采用直接进样的方法,同时检测葡萄酒中白藜芦醇

分别置于254nm和306nm紫外灯下照射,于不同

及其糖苷异体4种成分,检测方法快捷、准确。

的时刻取样进行HPLC分析,测定顺式异构体峰

1材料和方法面积。发现无论是白藜芦醇还是白藜芦醇苷,在

254nm下的转化速度均高于306nm时的。所以,

1.1色谱系统

我们选择254nm作为实验的转化波长。

高效液相色谱仪由美国Spectra—Physics公司

在后续实验测定白藜芦醇化合物工作曲线后,

生产,包括SYSTEMSCM400在线脱气机、P4000

利用工作曲线将上文中顺式异构体的峰面积换算为

高压恒流泵、7725i手动进样器、Focus紫外吸

相应的浓度,绘制白藜芦醇转化速率图(见图1)。

收检测器。色谱柱为InertsilODS一3C色谱柱

(4.6×250mm,51TI)。美国Anastar色谱工作站。

1。2药品和试剂

反式白藜芦醇和反式白藜芦醇苷标准品由北京

迪尔塔生物技术有限公司生产。实验中使用乙腈为

色谱纯,由美国TEDIA公司生产;实验用水为超

纯水,由Millipore超纯水机制得。

1。3色谱条件

将实验材料葡萄酒10000rpm离心15m

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