酶制剂发酵工艺.pptVIP

酶制剂发展概况;第一节酶的生产方法;二、应用微生物来开发酶的优点;三、酶发酵生产的类型;第二节酶生物合成的基本理论;二、酶生物合成的调节;酶合成的基因调控类型：诱导和阻遏

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;2、酶合成的阻遏;第三节微生物发酵产酶工艺条件及控制;;保藏菌种;二、酶生产菌种;（二）常用的产酶微生物;2、放线菌

链霉菌：葡萄糖异构酶、青霉素酰化酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、几丁质酶等。;3、霉菌

黑曲霉：糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶、核糖核酸酶、橙皮苷酶等。

米曲霉：氨基酰化酶、磷酸二酯酶、果胶酶等。

红曲霉：α-淀粉酶、糖化酶、麦芽糖酶、蛋白酶等。

青霉：葡萄糖氧化酶、苯氧甲基青霉素酰化酶、纤维素酶等。

木霉：纤维素酶。

根霉：糖化酶、蔗糖酶、碱性蛋白酶，脂肪酶、果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等。

毛霉：蛋白酶、糖化酶、α-淀粉酶、脂肪酶、果胶酶、

凝乳酶等。;4、酵母

啤酒酵母：丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶等。

假丝酵母：脂肪酶、尿酸酶、尿囊酸酶、转化酶、醇脱氢酶等。;工业规模应用的微生物酶和它们的某些来源;纤维素酶;转化酶;（三）生产菌种的来源;（1）样品的采集：主要是各种富含所需微生物的土壤、水、气、枯枝烂叶、烂水果等；;（2）初筛：分离产目的酶的菌株；

给予特殊的培养基或培养条件，进而让目的菌株得以繁殖，尽可能地把只成为目的菌的菌株分离出来。;（3）复筛：从所得菌株中筛选优良株；

在初筛的基础上，筛选产酶量高、性能更符合生产要求的菌种。;（四）生产种子的制备;（1）菌种活化;扩大培养应注意的事项：

（1）尽量减少传代次数，以降低菌种衰退和污染的可能性；

（2）培养基成分一般应比发酵培养基的氮源丰富；

（3）培养时间一般控制在微生物生长的对数生长期，及时接入下一级培养或发酵罐；

（4）严格控制培养条件（pH、温度、通气量等），加强培养过程的实时监测。;三、培养基;2、氮源：提供氮元素。;4、生长因子;配制培养基的注意事项：

（1）培养基的碳氮比是培养基成分配比的重点；

（2）碳源和氮源的选择，要注意避免碳分解代谢阻遏和氮分解代谢阻遏；

（3）培养基中无机盐的选择要注意盐类引起的生理酸碱性反应；

（4）发酵生产所用的培养基成分配比不可轻易改变。;（二）培养基的种类;四、发酵条件的控制—影响产酶的几个重要条件;（3）温度的控制方法;2、pH值的调节控制;（4）影响pH值的因素;3、溶解氧的调节控制;5、湿度的调节控制;五、提高酶产量的措施;（二）控制阻遏物的浓度;（三）通过基因突变提高酶产量;2、其他产酶促进剂;第四节酶的分离纯化;1、细胞破碎

许多酶存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。

1）机械破碎

2）物理破碎

3）化学破碎

4）酶解破碎;酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂或溶液处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。也称为酶的抽提。

酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质，选择适当的溶剂。一般说来，极性物质易溶于极性溶剂中，非极性物质易溶于非极性的有机溶剂中，酸性物质易溶于碱性溶剂中，碱性物质易溶于酸性溶剂中。

酶都能溶解于水，通常可用水或稀酸、稀碱、稀盐溶液等进行提取，有些酶与脂质结合或含有较多的非极性基团，则可用有机溶剂提取。;酶的主要提取方法;（1）沉淀分离;盐析;有机溶剂之所以能使酶沉淀析出。主要是由于有机溶剂的存在会使溶液的介电常数降低。例如，20℃时水的介电常数为80，而82％乙醇水溶液的介电常数为40。溶液的介电常数降低，就使溶质分子间的静电引力增大，互相吸引而易于凝集，同时，对于具有水膜的分子来说，有机溶剂与水互相作用，使溶质分子表面的水膜破坏，也使其溶解度降低而沉淀析出。;（2）过滤与膜分离;过滤的分类及其特性

(根据过滤介质截留的物质颗粒大小不同);微滤0.1～10?m：

细菌、煤灰、发酵细胞、颜料、蛋白等;（3）酶的浓缩、干燥与结晶;谢谢大家！