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解码血管生成素互作蛋白网络：构建、分析与医学启示

一、引言

1.1研究背景与意义

血管生成在众多生理和病理过程中扮演着不可或缺的角色，其中肿瘤血管生成更是肿瘤生长、侵袭和转移的关键环节。肿瘤细胞的快速增殖需要充足的营养和氧气供应，而新生血管的形成恰好满足了这一需求，为肿瘤细胞提供了必要的物质基础，同时也为肿瘤细胞进入血液循环并发生远处转移创造了条件。因此，深入研究肿瘤血管生成的分子机制，对于理解肿瘤的发生发展过程以及开发有效的肿瘤治疗策略具有至关重要的意义。

血管生成素（Angiopoietin，Ang）作为一类重要的血管生长因子，在肿瘤血管生成等过程中发挥着核心作用。目前已知该家族包括Ang1、Ang2、Ang3、Ang4四个成员，它们通过与特异性受体Tie2相互作用，调节血管内皮细胞的存活、增殖、迁移以及血管的稳定性和成熟等过程。其中，Ang1和Ang4作为Tie2的激动剂，能够激活Tie2受体，促进血管的成熟和稳定；而Ang2和Ang3则作为拮抗剂，抑制Ang1的功能，在血管生成的不同阶段发挥着复杂的调节作用。例如，在肿瘤血管生成的早期，Ang2的表达增加，它可以拮抗Ang1维持内皮细胞稳定性的作用，使内皮细胞与周围支持细胞的联系松解，从而促进内皮细胞的增殖和迁移，为肿瘤血管的形成创造条件。随着肿瘤的发展，Ang1和Ang2的平衡状态会发生动态变化，这种变化与肿瘤血管的重塑、成熟以及肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。

构建血管生成素相互作用蛋白质网络，对于全面揭示肿瘤血管生成等复杂生理病理过程的分子机制具有重要意义。蛋白质-蛋白质相互作用是细胞生命活动的基础，几乎所有的生物学过程都依赖于蛋白质之间的相互协作。通过构建血管生成素相互作用蛋白质网络，可以系统地分析与血管生成素相互作用的蛋白质群体，了解它们之间的相互作用模式和调控关系。这不仅有助于深入理解血管生成素在肿瘤血管生成中的具体作用机制，还可能发现新的参与肿瘤血管生成的关键分子和信号通路。此外，蛋白质相互作用网络的构建还为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点和思路。通过对网络中关键节点蛋白的研究，可以开发出更加精准有效的肿瘤诊断标志物和治疗药物，为肿瘤患者的临床治疗带来新的希望。

1.2血管生成素概述

血管生成素的发现源于对血管生成调控机制的深入探索。1996年，Davis等在寻找Tie2的配体时，首次从cos细胞中成功获取了人和小鼠的Ang-1的cDNA，这一发现开启了对血管生成素家族研究的新篇章。随后，Maisonpierre等在1997年以小鼠Ang-1cDNA为探针，在低严谨度条件下筛选人和小鼠的cDNA文库，获得了人和小鼠的Ang-2cDNA。此后，Valenzuela等又分别从小鼠和人的基因文库内克隆出Ang-3基因和Ang-4基因，至此，血管生成素家族的四个成员全部被发现。

从结构上看，血管生成素家族各成员的蛋白结构具有一定的相似性，都主要由三部分组成。N端为疏水性分泌信号肽，这一结构与血管生成素分泌到细胞外密切相关，它能够引导血管生成素穿过细胞膜，进入细胞外环境，从而发挥其生物学功能。中间是富α-螺旋的卷曲结构域（coiled-coildomain，CC），该结构域大约由180-200个氨基酸构成，其氨基酸序列折叠弯曲，形成独特的卷曲螺旋四级结构。这种结构对于血管生成素与其他蛋白形成多聚体起着关键作用，通过与其他蛋白的相互作用，血管生成素可以调节其自身的活性以及在细胞内的定位。C端是类纤维蛋白原结构域（fibrinogen-likedomain，FL），这是血管生成素中最具保守性的部分，包含受体结合部分，决定了某种Ang是否起激动作用。该结构域的高度保守性确保了血管生成素能够与受体Tie2特异性结合，从而激活下游信号传导通路，调节血管生成相关的生物学过程。

在功能方面，血管生成素在血管生成过程中发挥着关键的调节作用。其中，Ang1主要由血管旁支持细胞，如周细胞、血管平滑肌细胞和肿瘤细胞等合成，通过旁分泌作用，与附近内皮细胞膜上的Tie2受体特异性结合。这种结合能够引起Tie2受体的磷酸化，进而激活一系列下游信号通路，促进内皮细胞的迁移、粘附和存活，维持血管的稳定性和成熟。例如，在胚胎发育过程中，Ang1对于血管系统的正常发育和成熟至关重要，它能够引导内皮细胞的有序排列和血管网络的构建，确保血管系统的正常功能。而Ang2主要由内皮细胞表达，肿瘤细胞也可大量表达。它是Ang1的天然竞争性拮抗剂，在血管生成过程中发挥着更为复杂的作用。在血管生成的起始阶段，Ang2的表达增加，它可以与