内蒙古大学基因的工程大实验开的题目报告材料-绿色荧光蛋白.pdfVIP

学号

内蒙古大学生命科学学院生物系

基因工程实验室

本科基因工程大实验开题报告

论文题目：绿色荧光蛋白基因表达载体的构

建及在大肠杆菌中的表达

学生姓名：

年级：

专业：生物技术

指导教师：苏慧敏

实用标准文案

2012年7月30日

学生姓名民族性别出生年月

论文题目绿色荧光蛋白基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

开题时间2012年8月18日结题时间2012年8月30日

项目来源本科生基因工程大实验课

一、立论依据

“绿色荧光蛋白基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达”项目的选题和研

究的意义，国内外研究现状及发展趋势分析，主要参考文献及出处：

绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)最初是从多管水母(Aequorea

2+

victoria)中发现的一种蛋白质。当水母发光蛋白结合Ca后发出蓝色荧光,该

蓝光进一步激发绿色荧光蛋白产生绿色荧光。绿色荧光蛋白激发后发出的荧光

持续时间较长,且不需要任何其他辅助因子的作用。绿色荧光蛋白能在多种生

物,如细菌、粘菌、酵母、植物和哺乳动物中表达并产生荧光。绿色荧光蛋白

[1]

的这一种属不依赖的特性使其成为能被广泛运用的荧光标记分子。野生型绿

色荧光蛋白的分子量较小，仅为27~30kDa，而编码GFP的基因序列也很短。GFP

由238个氨基酸残基组成。GFP序列中的65-67位残基(Ser-Tyr-Gly)自发形成对

[4]

羟基苯咪唑啉酮基团而可以荧光发色。

在1994年发现绿色荧光蛋白后，国内外对绿色荧光蛋白的研究进一步发

展，目前在基因表达中可以利用绿色荧光蛋白进行基因整合、细胞分选及转基

因动物的研，根据其颜色的特殊性在细胞生物学中作为荧光标记用于细胞动态

的研究，在活细胞中可以利用其进行蛋白的定位，在westernblotting中可

[2]

作为一种体外检测手段。

在随着分子生物学理论与技术的发展,对绿色荧光蛋白的理论研究进一步

深入,并且绿色荧光蛋白在分子生物学领域的应用进一步加强,绿色荧光蛋白

工程,包括绿色荧光蛋白蛋白工程和绿色荧光蛋白基因工程的迅速发展,尤其

绿色荧光蛋白基因作为新型报告基因越来越受到关注,目前已经应用GFP作为

[2]

选择标记基因成功构建多种表达外源基因的重组质粒。

绿色荧光蛋白如要在各领域得到更加完整全面的应用,至少还需要几个

条件:基础理论体系的成熟完善、新型优良突变体的诞生以及与各种现代生物

技术的融合。与此同时,随着基因工程技术和细胞工程技术的日益成熟,我们

有理由相信,绿色荧光蛋白一定会给我们带来更多的应用价值,并进一步揭开

[3]

生命的未解之谜。

大肠杆菌（