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外源蛋白在芽孢杆菌中分泌表达的研究进展.pdf

2000,Vol.20,No.5

《生物工程进展》

外源蛋白在芽孢杆菌中分泌表达的研究进展

综述校审

邓兵兵熊凌霜

(100071)

军事医学科学院八所北京

摘要芽孢杆菌是很有潜力的分泌型基因工程宿主菌。本文概述了利用芽孢杆菌分泌表达外源

,,

基因时影响目的蛋白产率的一些主要因素如蛋白酶水解作用、缺乏适宜的分子伴侣、信号肽的

,

选择不当等并讨论了相应的解决对策。

关键词芽孢杆菌分泌表达外源蛋白

,95%

外源蛋白以分泌形式表达的优点主要在于目它们的酶活加起来占总酶活的以上。这些蛋

,

的蛋白能以活性结构生成而不发生聚集避免了复:

白酶的特性有①胞外酶都由含前肽序列的前体合

,,

性的困难产物与大量的细胞蛋白分离较易于纯,;

成可能有共同的分泌和成熟机制②Ⅰ类蛋白酶的

,

化。因此用分泌型宿主菌生产外源蛋白的研究越N,

端氨基酸序列高度相似次要丝氨酸蛋白酶和芽

来越为人们所关注。孢杆菌肽酶F的C端可缺失。但Ⅱ类蛋白酶组成

,

芽孢杆菌具有良好的分泌特性其发酵工艺和,

差异较大次要金属蛋白酶的组成与真核生物的酶

,

产物回收技术也较成熟用作外源蛋白的分泌型宿(E);

如人蛋白酶更相似③蛋白酶基本上在稳定期

[1]

,,

主菌具有很大的潜力。研究表明不少外源蛋;,

形成④主要蛋白酶由相同的调节基因族调控如

,

白都能在芽孢杆菌中分泌表达有些还获得了较高spo0prtRsacQsacUsacVhprsenS

、、、、、、等。随着

,

的产率。当然芽孢杆菌分泌表达系统还存在不少

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