体外诊断分子检验 静脉全血检验前过程规范 第3部分：从血浆中分离循环游离DNA标准立项修订与发展报告.docxVIP

《体外诊断分子检验静脉全血检验前过程规范第3部分：从血浆中分离循环游离DNA》标准化发展报告

EnglishTitle:StandardizationDevelopmentReporton“Invitrodiagnosticmolecularexamination—Pre-examinationprocessesforvenouswholeblood—Part3:IsolatedcirculatingcellfreeDNAfromplasma”

摘要

随着精准医疗时代的到来，以循环游离DNA（circulatingcellfreeDNA,ccfDNA）为代表的液体活检技术在肿瘤早期筛查、伴随诊断、疗效监测及预后评估等领域展现出巨大潜力。然而，ccfDNA在血液中含量极低、半衰期短，且其丰度与片段谱易受检验前过程（从采血到核酸提取前的所有步骤）中诸多因素的影响。这些因素包括采血管类型、运输时间与温度、离心条件、血浆分离与保存方法等。检验前流程的差异会导致ccfDNA发生降解、基因组DNA污染或数量波动，从而严重影响下游分子检测结果的准确性、可比性和可重复性，成为制约液体活检技术临床转化与应用推广的关键瓶颈。

本报告聚焦于国家标准《体外诊断分子检验静脉全血检验前过程规范第3部分：从血浆中分离循环游离DNA》的立项工作。本部分标准旨在针对ccfDNA检测的特殊性，建立一套科学、统一、可操作的静脉全血检验前处理规范。其主要技术内容涵盖用于ccfDNA分析的静脉全血标本的采集、运输、保存、处理（特别是离心分离血浆的关键步骤）以及全过程记录的要求与建议。本文件的制定与实施，将填补国内在ccfDNA检验前流程标准化领域的空白，为医学实验室、体外诊断试剂制造商、生物样本库及监管机构提供权威的技术依据，对于提升我国液体活检技术的整体质量水平、保障检测结果可靠性、推动相关产业健康有序发展具有至关重要的基础性意义。

关键词：循环游离DNA；检验前过程；标准化；液体活检；血浆分离；体外诊断；质量保证

Keywords:CirculatingcellfreeDNA(ccfDNA);Pre-examinationprocess;Standardization;Liquidbiopsy;Plasmaseparation;Invitrodiagnostic(IVD);Qualityassurance

正文

1.立项背景与目的意义

分子体外诊断是现代医学发展的核心驱动力之一，它通过分析人体生物样本（如组织、血液）中的核酸、蛋白质等分子信息，为疾病的预防、诊断和治疗提供了前所未有的精准工具。近年来，基于血液中循环游离DNA（ccfDNA）的检测技术——即液体活检，取得了突破性进展，尤其在肿瘤学领域，实现了无创、动态的基因突变检测和分子分型。

然而，技术的先进性高度依赖于样本的质量。检验前过程，即从患者准备、样本采集、运输、保存到处理（如离心、分装）的整个阶段，是分子诊断质量链中最脆弱且最易引入变异性的环节。对于ccfDNA而言，这一挑战尤为严峻。ccfDNA主要来源于凋亡或坏死的细胞，在血液中以核小体片段的形式存在，浓度低（ng/mL级别），且采血后血液中的细胞会持续释放基因组DNA，同时内源性核酸酶可能导致ccfDNA进一步降解。研究表明，采血管的选择、样本运输延迟、离心力与时间不当、反复冻融等操作，都会显著改变ccfDNA的浓度、片段大小分布以及目标突变等位基因频率，从而可能产生假阴性或假阳性结果。

因此，若缺乏标准化的检验前流程，后续即使采用最精密的检测仪器和最优化的试剂，其分析结果也可能无法真实反映患者体内的生物学状态，而是反映了检验前人为引入的“噪音”。这不仅影响个体患者的诊疗决策，也阻碍了多中心临床研究数据的整合与比较，更制约了以ccfDNA为基础的体外诊断试剂产品的研发与审评。

鉴于此，制定《体外诊断分子检验静脉全血检验前过程规范第3部分：从血浆中分离循环游离DNA》国家标准的根本目的与核心意义在于：通过建立一套详细、可追溯的技术规范，最大限度地减少检验前因素对ccfDNA分析结果的干扰，确保从不同机构、在不同时间点获取的样本具有可比性，从而为ccfDNA检测的准确性、可靠性和临床应用价值奠定坚实的技术基础。这是推动液体活检技术从实验室研究走向规模化临床应用的必经之路，也是提升我国分子诊断行业整体质量水平和国际竞争力的关键举措。

2.范围与主要技术内容

2.1范围

本文件是GB/T《体外诊断分子检验静脉全血检验前过程规范》系列标准的第3部分，专门针对循环游离DNA（ccfDNA）的检测需求。它规定了在进行分析试验之前的检验前阶段，