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实验一药物急性半数致死量（LD50）的测定

【目的】

了解药物半数致死量(LD)测定的意义、原理，掌握半数致死量的测定方法和计算过程。

50

【原理】

LD50是指在一群动物中能使半数动物死亡的剂量。由于实验动物的抽样误差，药物的

致死量对数值大多在50％质反应的上下呈正态分布。在这样的质反应中药物剂量和质反应

间呈S型曲线，S型曲线的两端处较平，而在50％质反应处曲线斜率最大，因此这里的药

物剂量稍有变动，则动物的死或活的反应出现明显差异，所以测定半数致死量能比较准确地

反映药物毒性的大小。

【实验材料】

1、动物：小白鼠，体重18-24g，雌、雄各半，实验前禁食12小时，不禁水。

2、药品：盐酸普鲁卡因，苦味酸。

3、器械：小鼠笼，天平，注射器（1mL），电子计算器。

【方法和步骤】

（一）预备实验

1、探索剂量范围：先找出100%及0%死亡的剂量，此即上下限剂量（D及D）。方

mn

法是先取出小鼠9-12只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药，如3只

小鼠全死则降低剂量一半，如全不死则增加剂量一倍，如部分死亡，则按2：1的比例向上、

向下调整剂量，由此找出上下限剂量。

2、确定组数，计算各组剂量：

确定组数（G）：可根据适宜的组距确定组数，一般分5-8个剂量组。

计算各组剂量：要求各组剂量按等比级数排列，在找出D及D和确定组数后，可按

mn

下列公式求出公比r：

（G-1）

r=D/D

mn

再按公比计算各组剂量D,D,D,D,D……D，其中D=D=最小剂量，D=Dr;

12345m1n21

D=Dr;D=Dr;D=Dr;……D=Dr。r值一般以1.7~1.15之间为宜。

324354GG-1

计算举例：已知某药在致死毒性实验中，Dm=187.5mg/kg;Dn=76.8mg/kg,确定组数

G=5，求r及各组剂量。先代入公式求r=1.25，再计算各组剂量D=Dn=76.8mg/kg,

1

D=76.81.25=96mg/kg,依次计算D，D，及D(D)分别为120，150，187.5mg/kg。

234G5

3、配制等比稀释药液系列，使每只小鼠给药容量相等，一般为0.1-0.25mL/10g。母液

浓度C=D/等容注射量，如某药的D=187.5mg/kg，等容注射量为0.2mL/10g，则母液浓

mm

度C=187.5（mg/kg）/0.2（mL/10g）=0.94%。按此配制母液25mL放入5号小烧杯，即为5

号液；从中吸出20mL放入4号小烧杯，加水至25mL，即为4号液；再吸出20mL4号液

放入3号杯中，加水至25mL，即为3号液，如此类推，配制出2号液和1号液。

（二）正式实验

1、分组编号：称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别用苦味酸做好标记。再按

确定组数（5组）分层随机分组，使各组平均体重及性别分布尽可能一致，每组一般用小鼠

10只（5只雄性，5只雌性）。

1、给药：先计算各体重组小鼠腹腔等容注射药量（0.2mL/10g），取相应的等比稀释药

液，给各组小鼠腹腔注射。给药顺序：如分为5组，先按2、3、4组顺序给药，再根据实验