嗜酸乳杆菌的氮源筛选与培养基优化.pdfVIP

嗜酸乳杆菌的氮源筛选与培养基优化

摘要：本研究对该嗜酸乳杆菌培养基配方进行了优化，利用单因素实验筛选不

同营养类型的酵母浸粉及不同分子量肽段的大豆蛋白胨，最后采用响应面试验设

计对培养基组分进行进一步优化得出其最适培养基方案。结果表明，以麦芽糖

20g/L，酵母浸粉FM50220g/L，大豆蛋白胨FP40320g/L，硫酸镁0.58g/L，硫酸

锰0.25g/L，乙酸钠5g/L作为优化后的培养基进行嗜酸乳杆菌的培养，ΔOD600可

以达到8.5，活菌数可达到9.05×108cfu/mL。

Abstract：Thisresearchfocusedontheoptimizationofculturemediumfor

acidophilus.Weselectedsuitableyeastextractandsoybeanpeptonefromdifferent

nutritionaltypesofyeastextractanddifferentmolecularweightpeptidesofsoybean

peptonebysingle-factorexperiment,reachedtheoptimumformulationbyResponse

SurfaceExperimentandthehighestviablecountofthecultivationofacidophilusis

9.05×108cfu/mL.TheresultshowsoptimumformulationcontainsMaltose20g/L,Yeast

ExtractFM50220g/L,SoybeanPeptoneFP40320g/L,MgSO40.58g/L,MnSO40.25g/L,

Sodiumacetate5g/L.

关键词：嗜酸乳杆菌；培养基优化；酵母浸粉；大豆蛋白胨；响应面设计

嗜酸乳杆菌是人体和动物肠道内的重要有益微生物，与人类和动物肠道健康

息息相关[1]，也是目前人类膳食补充剂、乳品饮料及饲料添加剂中常见的菌种之

一[2,3]。嗜酸乳杆菌作为工业化的益生菌由来已久，企业的工业生产水平依然参

差不齐，生产也面临着一些问题如生产波动大、产品稳定性差等，其中涉及的因

素有很多[4]，发酵培养基配方往往最受关注。

在乳酸菌发酵培养中有机氮源的影响最为显著[5]，本研究在进行嗜酸乳杆菌的培

养基优化过程中，着重研究了乳酸菌培养基中常用有机氮源中酵母浸出物、蛋白

胨等的选择问题，以期对各生产单位及研究工作者在嗜酸乳杆菌的培养中有所帮

助，为嗜酸乳杆菌的发酵原料选择提供一定的数据支撑。

1材料与方法

1.1菌种、试剂与培养基

嗜酸乳杆菌（Lactobacillusacidophilus）由安琪酵母股份有限公司微生物营养事

业部保存。

MgSO4、KH2PO4、MnSO4、柠檬酸氢二铵、乙酸钠购自国药

葡萄糖、琼脂粉为国产生化试剂

酵母浸粉FM902、FM803、FM502、FM860、FM808，均由安琪酵母股份有限公司

提供

大豆蛋白胨FP401、FP402、FP403、FP404、FP405，均由实验室制备

菌种活化培养基和计数培养基分别为MRS液体培养基和MRS固体培养基，发酵

初始培养基为MRS培养基。

MRS培养基：葡萄糖20g/L、MgSO40.58g/L、MnSO40.25g/L、乙酸钠5g/L、磷

酸二氢钾3g/L、柠檬酸氢二铵2g/L，吐温-801mL/L，酵母浸粉5g/L、蛋白胨

10g/L，牛肉浸膏10g/L，蒸馏水1L，初始pH6.5

1.2仪器设备

FiveEasyPlusFP20pH计梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司

HWS-350生化培养箱上海比朗仪器有限公司

Sp-750分光光度计上海光谱仪器有限公司

GI54DWS灭菌锅致微（厦门）仪器有限公司

SW-CJ-1Cμ型双人单面超净工作台苏州进化设备有限公司

1.3方法

1.3.1菌种活化及扩培

取-80℃保存的嗜酸乳杆菌冻存管1支，在MRS平板上划线，37℃培养24h，挑

取单菌落活化至新鲜斜面上，37℃培养过夜，