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分子病理学技术在肿瘤诊治中的应用

董贺;孙青

【摘要】近几十年来,新兴学科——分子病理学的出现,使得人类对疾病特别是肿瘤

的研究从器官、组织、细胞水平深入到蛋白、染色体和DNA水平.这不仅能为病

理诊断提供更准确、更客观的依据,且可更好地指导肿瘤的靶向治疗和预后判断等,

极大地推动了病理学的发展.分子病理学的技术如免疫组化、原位杂交、基因突变

检测、生物芯片、流式细胞术等,已经得到了广泛应用,并将在未来的医疗领域里扮

演越来越重要的角色.本文就近年来分子病理学技术在肿瘤诊治中的应用进行综述.

【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》

【年(卷),期】2015(007)002

【总页数】6页(P73-77,82)

【关键词】分子病理学技术;肿瘤诊治

【作者】董贺;孙青

【作者单位】山东大学附属千佛山医院病理科,山东,济南250014;山东大学附属千

佛山医院病理科,山东,济南250014

【正文语种】中文

传统病理学通常分为诊断病理学和实验病理学。前者通过尸体解剖（autopsy）、

活体组织检查（biopsy）和细胞学（cytology）检查对疾病做出最终诊断；后者

则以动物实验或在体外培养的细胞为材料进行研究。近几十年来，随着分子生物学、

免疫学、遗传学等学科的发展和免疫组化、原位杂交、流式细胞术等技术的应用，

极大地推动了病理学的发展，逐渐形成了一门新的分支学科——分子病理学，使

得对疾病特别是肿瘤的研究从器官、组织、细胞水平深入到蛋白、染色体和DNA

水平；并使形态学观察从定性走向定位、定量，更具客观性和可重复性。而分子病

理学技术能为病理诊断提供更准确、更客观的依据，从而更好地指导肿瘤的靶向治

疗和预后判断等，是现代病理学发展的方向和必不可少的手段。下面就相关分子病

理学技术在肿瘤诊治中的应用作简要介绍。

免疫组织化学是在蛋白水平上，利用抗原抗体的特异性结合反应检测和定位组织和

细胞中某种蛋白成分的技术。免疫组化技术有较高的特异性和敏感性，能同时将细

胞成分定位与形态学改变结合起来，且直接在组织切片、细胞涂片或培养细胞爬片

上检测，结合计算机图像分析等技术，可对被检测物质进行定量分析。现在已经广

泛应用于各种蛋白表达水平的检测、细胞属性和来源的判定、淋巴细胞的免疫表型

分析、细胞增殖和凋亡的研究、激素受体和耐药基因蛋白表达的检测等。如对乳腺

癌患者进行ER、PR、HER2的检测可以判断患者的预后和对靶向治疗药物（赫赛

汀等）的敏感性及指导内分泌治疗［1］；进行ERCC、RRM1、TS、TOPOIIA、

β-tubulin-Ⅲ等耐药基因蛋白表达的检测，以预测其对抗肿瘤化疗药物如铂类、吉

西他滨、培美曲赛和紫杉醇类的疗效等［2－3］。

原位杂交是用经标记的核苷酸片段作为探针，通过杂交直接在组织切片、细胞涂片

或培养细胞爬片上检测和定位某一特定靶基因存在与否的技术。ISH的原理是

DNA变性、复性和碱基互补配对结合。根据探针标记物的不同，如荧光素、地高

辛、生物素、放射性物质等，又分为荧光原位杂交，显色原位杂交，银染原位杂交

等。

2.1荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）

FISH可以检测基因（染色体）在较大的范围内发生的异常改变，如基因扩增、基

因缺失、染色体转位或染色体数目变化等，因其性能稳定和结果直观等优点，已有

很多商品化的试剂盒，如美国Vysis、北京金菩嘉、广州安必平等。目前主要被用

于乳腺癌和胃癌HER2基因扩增，尿路上皮癌、宫颈癌、淋巴瘤、白血病、性染

色体的检测和产前诊断。在免疫组化检测乳腺癌和胃癌HER2蛋白表达意义不明

确时，需做FISH检测进一步验证其有无HER2基因的扩增，以正确指导赫赛汀的

应用；此外还对化疗以及疾病的预后预测有重要的指导意义［4］，是判断HER2

基因扩增的金标准。FISH一般采用双色探针标记，其优点是对比鲜明，红色信号

和绿色信号融合时可产生黄色信号，可用于一些融合或转位基因的判断。缺点是需

配备荧光显微镜及采图软件（FISH工作站），且玻片不能长期保存。

2.2显色原位杂交（chromogenicinsituhybridization，CISH）

CISH的应用也很广泛，即一般意义的原位杂交。利用生物素和亲合素系统标记探

针和第一抗体，用辣根过氧化物酶（horseradishperoxidase，