Folin-酚试剂法测定蛋白质含量优缺点及应用.pdfVIP

Folin-酚试剂法的优缺点有哪些？

2007-11-2923:54

提问者：幻_su|：8239次|该问题已经合并到

2007-11-3008:54

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其基本原理应该很清楚了，所以在此就不作说明。需要注意的是，用此方法测蛋白质时，还

原反应发生在PH10的溶液中，而Folin试剂在碱性条件下不稳定，所以将Folin试剂加入碱

性的铜和蛋白质溶液中必须立即混匀，此反应只在极短时间内有效进行。试剂破坏后，还原

性的生成物可再次反应，后者的变化于30min可达到最大值。

对其评价是，该方法较双缩脲法反应灵敏，与0.1mg/ml浓度的蛋白质样品亦可得到很好的

显色反应，使用很广泛，但花费时间长，其干扰因素较多。

同问folin酚试剂法确定最大吸收波长意义

2011-4-611:03

提问者：吴00501|：762次

folin酚试剂法确定最大吸收波长意义（生化试验蛋白质的含量测定）

2011-4-623:19

满意回答

Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理，所用的试剂是由两部分组成的。第一部分

相当于双缩脲试剂，第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液)。因此，反应的程序

也是分两步进行的。第一步相当于双缩脲反应，在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用

生成络合物；第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件下极不稳定，易被

酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物(呈蓝色反应)。由于蛋白质中含有带酚羟基的酪氨

酸，故有此呈色反应。而且溶液颜色的深浅与蛋白质的含量成正比关系。此法也适用于测定

酪氨酸和色氨酸的含量。本法可测定范围是25—250μg蛋白质

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回答者：11来自团队生物天下|四级采纳率：20%

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.,

优点：是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多；重复性好颜色深析光度。

缺点：是费时间较长，要精确控制操作时间，曲线也不是严格的直线形式，且专一性较

差，干扰物质较多。

近年来folin-酚法逐渐被考马斯亮兰法所取代

同问紫外分光法时测定最大波长吸光度示何义么

,表,为?

2010-6-2006:44

提问者：|：1387次

,,?

紫外分光法时测定最大波长吸光度表示何意义为什么

2010-6-2008:51

意回答

具有最大吸光度的波长称为最大吸收波长，最大吸收波长一方面可以用来定性鉴定某些物

质，因为不同物质的最大吸收波长不一样；另一方面在最大吸收波长处通过测吸光度来测浓

-

度（朗伯比尔定律）所得结果的误差最小，因为吸光度大了，相对误差自然就小，所谓称

“”

量时的称大样也是这个道理。

具有最大吸光度的波长称为最大吸收波长，最大吸收波长一方面可以用来定性鉴定某些物质，因为不同物

质的最大吸收波长不一样；另一方面在最大吸收波长处通过测吸光度来测浓度（朗伯-比尔定律）所得结果

的误差最小，因为吸光度大了，相对误差自然就小，所谓称量时的“称大样”也是这个道理。

仪器专场展示：紫外－可见光谱可见分光光度计便携式分光光度计

：波长吸光度为什么最大紫外分光

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沙发只看作者回复于：2010-8-2320:52:54

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在最大吸收波长处测量不是误差最小，而是灵敏度最大。

并不是A越大误差越小，也不是A越小误差小。光度分析