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适配体赋能新型传感器：电化学发光与石英晶体微天平的创新融合与应用

一、引言

1.1研究背景与意义

在当今科技飞速发展的时代，生物分析和环境监测等领域对于高灵敏度、高特异性检测技术的需求日益迫切。适配体作为一种新型的分子识别元件，以其独特的性质在传感器领域崭露头角，为这些领域的发展注入了新的活力。适配体是通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX）筛选得到的单链DNA或RNA分子，能够与各种靶标分子如蛋白质、小分子、金属离子等特异性结合，其结合能力可与抗体相媲美，甚至在某些方面表现更为出色。

基于适配体的电化学发光传感器和石英晶体微天平传感器应运而生，成为了研究的热点。电化学发光传感器结合了电化学和化学发光的优势，具有灵敏度高、响应速度快、设备简单等优点；石英晶体微天平传感器则能够实时、原位监测质量的微小变化，具有高灵敏度和无需标记等特性。这两种传感器的出现，为生物分子的检测、环境污染物的监测等提供了新的手段。

在生物分析领域，对于疾病标志物的准确检测是疾病早期诊断和治疗的关键。传统的检测方法往往存在灵敏度低、特异性差等问题，难以满足临床需求。基于适配体的传感器能够特异性识别疾病标志物，如肿瘤标志物、病原体等，实现对疾病的快速、准确诊断，为患者的治疗争取宝贵时间。在环境监测领域，随着环境污染问题的日益严重，对各种污染物的实时监测至关重要。适配体传感器可以对水中的重金属离子、有机污染物，以及空气中的有害气体等进行快速检测，为环境保护提供有力的数据支持。

因此，开展基于适配体的电化学发光传感器及石英晶体微天平传感器的研究，不仅具有重要的理论意义，有助于深入理解适配体与靶标分子的相互作用机制以及传感器的传感原理，还具有广阔的应用前景，有望推动生物分析、环境监测等领域的技术革新，为人类健康和环境保护做出重要贡献。

1.2适配体的特性与应用基础

1.2.1适配体的基本概念与筛选技术

适配体（Aptamer）是一类能够与特定靶标分子高度特异性结合的单链核酸分子，包括单链DNA（ssDNA）和单链RNA（ssRNA）。它的发现源于对核酸分子功能多样性的深入探索，打破了人们对核酸仅作为遗传信息载体的传统认知。适配体的独特之处在于，它能够通过自身折叠形成复杂的三维结构，如发夹结构、假结结构、G-四链体结构等，这些结构与靶标分子之间通过多种相互作用，如氢键、范德华力、静电作用和碱基堆积作用等，实现高亲和力和高特异性的结合，其结合能力可与抗体与抗原的结合相媲美。

适配体的筛选主要依赖于指数富集的配体系统进化技术（SELEX），该技术由Tuerk和Gold于1990年首次提出，为适配体的获取提供了有效的途径。SELEX技术的基本原理是从一个包含巨大序列多样性的单链寡核苷酸文库出发，该文库通常由化学合成产生，包含1013-101?个不同序列的寡核苷酸分子。将这个文库与靶标分子在特定条件下进行孵育，使文库中的寡核苷酸分子与靶标分子充分接触。由于文库中序列的多样性，部分寡核苷酸分子能够与靶标分子特异性结合，形成适配体-靶标复合物。然后，通过一系列的分离手段，如亲和柱层析、磁珠分离、毛细管电泳等，将未结合的寡核苷酸分子去除，仅保留与靶标分子结合的寡核苷酸。接着，利用聚合酶链式反应（PCR）技术对这些结合的寡核苷酸进行扩增，得到大量的拷贝，形成下一轮筛选的文库。通过多轮这样的筛选、分离和扩增过程，与靶标分子结合能力较弱的寡核苷酸逐渐被淘汰，而结合能力强、特异性高的适配体则被逐步富集，最终从文库中筛选出能够与靶标分子高度特异性结合的适配体。

随着技术的不断发展，传统的SELEX技术也在不断改进和优化，衍生出了多种新型的SELEX技术。例如，毛细管电泳-SELEX（CE-SELEX）利用毛细管电泳的高效分离能力，能够快速、准确地分离适配体-靶标复合物，大大缩短了筛选时间；细胞-SELEX（Cell-SELEX）则直接以完整的细胞作为靶标，能够筛选出针对细胞表面特定标志物的适配体，为细胞识别和疾病诊断提供了有力的工具；指数富集配体系统进化测序技术（Apta-Seq）将高通量测序技术引入SELEX过程，实现了对适配体文库的大规模分析和筛选，提高了筛选效率和准确性。这些新型的SELEX技术进一步拓展了适配体的应用范围，为适配体的研究和开发提供了更多的可能性。

1.2.2适配体的优势

与传统的抗体相比，适配体在多个方面展现出显著的优势，这些优势使得适配体在生物分析、环境监测、药物研发等领域具有广阔的应用前景。

在合成方面，抗体的制备通常依赖于动物免疫和细胞培养技术，过程复杂且耗时较长，需要数周甚至数月的时间。而且，动物免疫过程中存在个体差异，导致抗体的批次间一致性较差。适配体则