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巴西蜂胶和中国蜂胶对比检测报告

*******蜂产品研究中心

2015年11月20日

样品来源及描述

1．巴西蜂胶：

Bioessens1：绿色蜂胶，块状;

Bioessens2：棕绿色，块状;

Bioessens3：棕色，块状。

2．中国蜂胶：

深棕色，块状。

二、样品处理

将蜂胶至于4℃

三、测定方法

1．提取率的测定方法

参考GBT24283—2009（5.3.2）标准测定。具体如下：

1.1原理

称量乙醇不溶物质量，用减量法计算其占样品质量的百分比。

1.2试剂和材料

a)乙醇:分析纯（≥95%）;

b)定量滤纸φ12.5cm。

1.3仪器

a)天平(感量0.001g)；

b)100ml烧杯；

c)电热鼓风干燥箱；

析柱活塞将黄酮洗脱于25ml容量瓶中，用甲醇定容至25ml。此液置1cm比色皿中于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品，用标准曲线法定量。

b)芦丁标准曲线：分别吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，置1cm比色皿中于波长360nm测定吸收值，绘制标准工作曲线，计算回归方程。

2.4计算和结果表示

按式（2）计算：X2=（2）

式中：X2——试样中总黄酮的含量，单位为毫克/每百克（mg

/100g）;

A——由标准曲线算得被测液中黄酮量，单位为微克（μg）;

V2——试样定容总体积，单位为毫升（ml）；

V1——吸取的上清液体积，单位为毫升（ml）；

m3——试样质量，单位为克（g）。计算结果保留二位有效数字。

3．抗氧化测定方法

3.1材料与试剂

a)DPPH（90%，Sigma生产）;

b)甲醇:分析纯（≥95%）;

3.2仪器

UV75IGD紫外/可见光分光光度计(上海分析仪器厂)。

3.3方法步骤

a)配置浓度均为1mg/ml的四种蜂胶的甲醇溶液：

准确称取0.1g蜂胶提取物于容量瓶中，用甲醇定容至100ml待用。

b)配制浓度为0.025mg/ml的DPPH溶液：

准确称取0.0025gDPPH试剂，用甲醇溶解并定容至100ml待用。

c)分光光度法评价不同蜂胶对DPPH·自由基的清除作用:

参考larrauri[1]和yokozawa[2]的方法进行改进。分别吸取0.05、0.15、0.25ml的四种蜂胶溶液（1mg/ml）,加入0.025mg/ml的DPPH甲醇溶液4ml，室温下避光放置30min后于517nm处测定吸光值。在相同条件下作平行试验。

3.4计算与结果

DPPH·的清除率通过下式计算：

清除率（﹪）=(A0-A)/A0×100﹪

式中：A0—空白试剂吸光值；

A—不同梯度溶液吸光值。

四、结果

1．巴西蜂胶与中国蜂胶的乙醇提取率

样品

提取率

中国蜂胶

57.77%

Bioessens1

59.42%

Bioessens2

55.64%

Bioessens3

60.08%

2．巴西蜂胶与中国蜂胶的总黄酮含量

样品

总黄酮含量（%）

中国蜂胶

23.3

bioessens1

8.81

bioessens2

10.12

bioessens3

10.38

3．巴西蜂胶和中国蜂胶对DPPH自由基的清除率

清除率（%）

0.05mL

0.15mL

0.25mL

中国蜂胶

40.4908

61.1963

71.6258

Bioessens1

38.8037

62.7301

71.319

Bioessens2

39.4172

61.5031

70.3988

Bioessens3

33.8957

62.4233

71.9325

参考文献：

[1].LarrauriJA,SanchezMorenoC,SauraCalixtoF.Effectofextractsfromredandwhitegrapepomacepeels[J].AgricFoodChem,1998,46:2143.

[2]YokozawaT,DongE,NatagawaT,etal.Invitroandinvivostudiesontheradicalscavengingactivityoftea[J].AgricFoodChem,1998,46:2143.