胚胎工程培训讲学.ppt

胚胎工程;现代生物科技专题;胚胎工程的概念：

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需要移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求。

;操作对象：早期胚胎和配子

技术手段：胚胎移植、体外受精、

胚胎分割、胚胎干细胞培养等

理论基础：1.生殖细胞的形成：生殖细胞分别由性原细胞经过减数分裂而成的。

2.胚胎的发育：精子和卵细胞受精合成的受精卵是下一代新生命的开始。

;（1）发生场所：睾丸的曲细精管

（2）时间：初情期——生殖机能衰老

;1、发生部位：卵巢和输卵管

2、时间：

?卵原细胞和初级卵母细胞的形成在胚胎时期；（卵巢）

?减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成；（卵巢）

?减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程完成的。（输卵管）;精原细胞;精子细胞变形中的主要变化：;卵原细胞;项目;卵子受精的标志：

当在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经受精。;二、受精;二)受精阶段:

1)精子穿越放射冠和透明带:

顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞

透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障

2)精子进入卵细胞膜:

卵细胞膜反应是防止多精入卵受精的第二道屏障

3)原核形成：雄原核形成和雌原核形成

4)配子结合：雌雄原核融合形成合子(受精卵);一)受精前的准备阶段:

1)精子获能:精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才获得受精能力的生理现象.

2)卵子的准备:在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期,才具有与精子受精的能力;精、卵相遇;;3、受精的意义;受精卵;1、个体发育的起点——受精卵

受精卵一形成就在输卵管内进行有丝分裂。

2、卵裂期——输卵管

分裂方式：有丝分裂

细胞数目：

细胞体积：

胚胎总体积：;3、桑葚胚——在透明带内

细胞数目：32个左右

细胞特点：

每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能性细胞。

;囊胚期;囊胚腔;;(一).卵母??胞的采集和培养;(二).精子的采集和获能;二.胚胎早期培养;一、胚胎移植;目前由于无法进行全体外胚胎培养，胚胎移植成为胚胎工程中获得后代的唯一方法。;1、供、受体的选择和处理:使用激素进行同期发情处理、超数排卵处理

2、配种或人工授精

3、胚胎收集（冲卵）、检查（胚胎发育到桑椹胚或囊胚）、培养或保存（-196OC的液氮）

4、胚胎移植：手术法（引出子宫和卵巢将其注入）、非手术法（用移植管将其送入子宫）

5、对受体母畜进行是否妊娠的检查。

;选择;2。胚胎移植的意义

⑴加速育种工作和品种改良；

⑵大量节省购买种畜的费用；

⑶一胎多产；

⑷保存品种资源和濒危物种；

⑸可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量。;胚胎的来源：

雌性动物的早期胚胎或体外受精及其他方式得到的胚胎。

供体：提供胚胎的个体,优良性状。

受体：接受胚胎的个体。

受体的条件：

同种、生理状态相同,健康,生殖机能正常的本地种。

;3.胚胎移植的生理学基础;3.受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

为胚胎在受体内的存活提供了可能;供体：提供胚胎的个体,优良性状。

受体：接受胚胎的个体。

受体的条件：

同种、生理状态相同,健康,生殖机能正常的本地种。

供体的主要职能：

只产生具有优良遗传特性的胚胎，大大缩短了供体本身的繁殖周期，增加了供体一生繁殖的后代数量。

受体的职能：

担任繁重而漫长的妊娠和育仔的任务;二.胚胎分割;4、选择的胚胎：

发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。

5、使用的主要仪器：

实体显微镜和显微操作仪。

6、具体操作:

用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。;7、操作注意事项：

①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。

②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低。

8、胚胎分割技术的缺陷

（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；

（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。

;三.胚胎干细胞;谢谢大家！