荧光定量课件.pptxVIP

荧光定量;

产品简介

创新技术

操作界面

应用

;Eco实时荧光定量PCR系统由1975年诺贝尔生理学和医学奖获得者DavidBaltimore博士和世界著名光子与微细加工专家AxelScherer博士共同研发;仪器状态指示灯;马达;Twosetsof48high-power

fixedLEDsforexcitation;Eco独特得校准优化数据质量;PCR之前:预扫描(prescan),检测LED初始光强

基于预扫描:ALC调节LED发光持续时间,确保每一孔:

在每一循环时有相等得光强激发

减少孔间交叉干扰;大家有疑问的，可以询问和交流;

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F;独特得图标驱动用户界面,大大简化了实验设计和设置;简捷得样品类型设置;直观得循环界面;绝对定量分析

2、相对定量分析--基因表达差异分析

3、HRM分析

4、基因分型

;AbsoluteQuantification;PlateLayout;StandardCurve;RelativeQuantification;PlateLayout;RQvssample;高分辨率熔解(HighResolutionMelting,HRM)分析技术就是基于核酸得物理性质,通过饱和得插入染料监控DNA熔解曲线变化而进行分析得一种技术。

扩增子得熔解曲线完全取决于DNA碱基序列。只要一个碱基发生了突变,就会改变DNA链得解链温度。HRM可以区分单碱基差异。

HRM检测不受突变碱基位点和种类得局限,无需使用序列特异性探针,具有高灵敏度、操作简单、高通量、成本低等优点

HRM应用主要基于两种技术得进步:

具有精确控温装置和高密度数据采集得仪器(解链温度差异极小,零点几摄氏度,使用高分辨率得仪器才可以检测)

双链DNA嵌入型饱和荧光染料如LCGreen

;HRM分析过程;应用:

突变发现/筛查/扫描

SNP基因分型/等位基因区分

物种鉴定

表观遗传学/DNA甲基化

微卫星分析?

???;Genotyping;实验注意事项;问题……?;Illumina公司就是一家集开发,制造及销售用于分析遗传变异和生物功能得综合系统得高科技公司。1998年成立,2005年进入中国,并以惊人得速度不断发展,于2007和2009年两次入选福布斯杂志评出得美国年度成长速度最快得高科技公司,同时亚太地区也就是Illumina全球增长最快得区域。

2010年Illumina并购Helixes公司。;14seriesof2foldserialdilutionB-Actin

FamlabeledTaqmanprobechemistry;开放得平台:支持实时PCR得全部应用,包括最具挑战性得高分辨熔解(HRM)曲线分??

性能卓越:灵敏得精密控制得光学技术;精准得温度控制技术和极佳得温度均一性;Cq值重复性高,数据准确性高,

4色荧光检测:同类产品荧光通道最多

标准化:出厂时已对SYBR、FAM、HEX、VIC、ROX和Cy5等荧光染料进行校正,遵循MIQE指导原则

软件:以图标驱动得软件界面,实验设计和设置简单,简洁明了得操作流程只需3个步骤

通量:48孔反应板,满足绝大多数用户得需求

微量:5~20μl反应体系,节约成本

快速:40个循环＜40分钟

小型:结构紧凑、体型小巧,适合个人使用

便宜:同类产品价格最低;HRM分析;嵌入型染料--非饱和染料SYBR?GreenI

SYBR?GreenI对PCR有抑制作用,必需使用低浓度;即使就是高浓度,也不能饱和插入DNA双螺旋结构中得小沟

非饱和态结合使染料在熔解过程中发生重排,染料分子重新结合到双链DNA得空置位点,造成荧光信号没有变化,特异性下降;谢谢大家！