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试验研究现代园艺2019年9期

基于RAPD分析的李子新品种鉴定

1221,22

乔改霞，陈建伟，王翠平，严莉，李健

（1宁夏大学农学院，宁夏银川750004；2宁夏林业研究院种苗生物工程国家重点实验室，宁夏银川）

：以改进CTAB法对玉皇李和未鉴定新品种叶片基因组DNA的提取进行了试验。结果表明，该方法从这2个品种李树叶

片中均能提出基因组总DNA，且DNA的纯度和完整性均较好，OD260/OD280的比值在1.8~2.0之间，无降解现象，RNA去除净；

此外，运用RAPD标记方法对这2个李品种基因组总DNA进行了PCR扩增，其RAPD分析条带清晰，用20条随机引物共扩增

出114条带，平均每条引物扩增出5.7条条带，扩增片段长度为200~2000bp，其中P、P、P、P和P5条随机引物可以单引物区

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分这2个品种，共获得20个条带，其中差异条带有6个，表明这6个位点存在差异。因RAPD每条扩增谱带对应基因组DNA分

子上的一个位点，说明供试品种间DNA位点存在差异，表明未鉴定新品种在培过程中发生突变和分化，可能是1个优良种源。

：李；成熟叶片；DNA提取；RAPD

随着分子生物学的发展，分子标记技术以其简单、应用于遗传多样性、近缘关系、品种鉴别等的研究中。

快捷、实用等优势而成为植物遗传育种领域研究的有Khadivi等[10]应用RAPD标记并结合形态学标记对28

力工具之一，RFLP（restrictionfragmentlengthpolymor-个伊朗本土甜樱桃和11个国外甜樱桃品种的遗传多

phism）、RAPD（randomamplifiedpolymorphicDNA）、样性进行分析，表明品种之间存在着高的遗传变异。

[11]

AFLP（amplifiedfragmentlengthpolymorphism）和SSRBoonpra-kob等用RAPD多态性标记分别对加利福

（simplesequencerepeats）等多种分子标记技术已广泛尼亚州和美国东南地区的日本李和中国李、欧洲李以

[12]

应用于多种植物的遗传多样性、亲缘关系、遗传图谱构及美国本土杂交李品种亲缘关系进行分析。Lu等用

建及进行分子辅助育种等多方面的研究[1,2]，而制备高6个RAPD引物就区分了18个桃砧木品种，聚类分析

质量的DNA是进行分子标记的基础。植物DNA的提结果与以前系谱分析完全吻合，证明RAPD技术能够

取方法很多，但如何在这些技术操作过程中获得高质进行桃品种鉴定。

量DNA样品是广大生物技术工作者关心的问题。本试验中运用RAPD标记方法对2个李品种基因

不同植物或同种植物的不同组织具有其各自的特组总DNA进行了PCR扩增，其RAPD分析条带清晰，

点，其次生代谢产物的种类和含量差异很大，所以很难用20条随机引物共扩增出114条带，平均每条引物扩

用一种方法来提取不同植物的DNA。果树成熟叶片中增出5.7条条带，扩增片段长为200~2000bp。20条