临床医学检验临床免疫技术(058)(正高级)高级卫生专业技术资格考试复习策略详解.docxVIP

高级卫生专业技术资格考试临床医学检验临床免疫技术(058)(正高级)应考重点

一、绪论与基础知识

临床免疫学发展简史与重要里程碑

免疫技术重要进展（如补体技术、血清学反应、单克隆抗体、流式细胞术、基因工程诊断等）。

免疫系统组成与功能

免疫器官：中枢免疫器官（骨髓、胸腺）和外周免疫器官（淋巴结、脾脏、黏膜相关淋巴组织）的结构、功能。

免疫细胞：

来源、发育、分化（骨髓造血干细胞、胸腺上皮细胞等）。

主要细胞类型：淋巴细胞（T细胞、B细胞、NK细胞）亚群的表面标志、分化抗原、细胞因子分泌特性、主要功能；吞噬细胞（中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞）的吞噬、呈递、细胞因子参与；树突状细胞（DC）的种类、特征与抗原呈递功能；肥大细胞、嗜酸性粒细胞等其他免疫细胞的特性与功能。

细胞因子（分类、结构、来源、生物学功能、网络调节）。

补体系统：成分、激活途径（经典、凝集素、替代）、生物学功能（溶解、调理、免疫调节）。

免疫应答机制

固有免疫应答：识别模式（PAMPs和DAMPs）、主要细胞和分子（吞噬细胞、NK细胞、补体、Toll样受体等）、特点与作用。

适应性免疫应答：

抗体（B细胞应答）：抗原识别、B细胞活化（双重信号）、类别转换、抗体多样性、亲和力成熟、记忆形成、免疫调节。

T细胞应答：抗原呈递细胞（APC）提呈抗原给T细胞受体（TCR）；辅助性T细胞（CD4+）亚群（Th1,Th2,Th17,Treg等）的功能与细胞因子；细胞毒性T细胞（CD8+）的加工提呈与杀伤机制；迟发型超敏反应；细胞记忆。

免疫调节：免疫系统自身的调控机制（负反馈、免疫耐受、免疫调节网络）。

免疫应答相关基因

主要组织相容性复合体（MHC/HLA）：结构、分类（HLA-I,HLA-II,HLA-III）、基因alogy、生物学功能（免疫识别、自身耐受）。

免疫球蛋白（Ig）基因、T细胞受体（TCR）基因的V(D)J重排与体细胞超突变。

临床免疫病理

免疫缺陷病：分类（原发性/继发性）、病因、临床表现、实验室检查（细胞免疫、体液免疫指标检测）。

自身免疫病：病因假说、发病机制、常见疾病（类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等）、自身抗体谱。

变态反应：类型（I-V型）、机制、常见疾病。

免疫相关疾病：肿瘤免疫、移植免疫。

二、临床免疫检验技术原理与方法

1.常用抗原抗体反应原理与技术

凝集反应：

抗原抗体反应基本原理：亲和力、特异性、可逆性（动力学特征）。

血清学试验分类与原理：单向/双向琼脂扩散、免疫比浊法（透射/浊度）、免疫电泳（醋酸纤维膜、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶）、辣根过氧化物酶标记免疫比浊法（干试剂）。

沉淀反应：

毛细血管凝聚试验原理。

免疫印迹技术（WesternBlot）：原理、应用（蛋白质鉴定、表达分析）。

补体结合反应：

综述：原理、临床应用、定性与半定量方法。

补体片段酶联免疫测定（ELISA）：

原理：固相包被/酶标记抗体/底物显色。

主要类型：间接法、双抗体夹心法、竞争法、捕获法。

微量磁珠结合免疫分析技术（MBIA）原理与特点。

时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）：原理、优势（高灵敏度、长寿命标记）。

发光免疫分析技术（化学发光免疫分析法CLIA）：原理、优势（超敏、半抗原应用、自动化）。

乳胶凝集试验：

原理、试剂（抗体/抗原/抗原抗体复合物）类型、应用。

对流免疫电泳（CIEP）、火箭免疫电泳（RIEP）、免疫dotblot：原理、特点。

2.固相酶免疫测定技术

酶联免疫吸附测定（ELISA）的深入：

关键技术：酶标记物（HRP、AP等）特性与底物显色；抗体效价、亲和力选择。

抑制法原理（用于定量检测小分子抗原）。

可溶性抗原/抗体检测原理。

多克隆抗体与单克隆抗体的制备（杂交瘤技术优选）、纯化与鉴定。

TRFIA与CLIA的技术要点：仪器、试剂、质量控制、结果判读。

数字化及定量数字化技术的应用。

3.液相免疫分析技术

化学发光免疫分析法（CLIA）：最新进展（时间分辨vs均相）。

荧光免疫分析法（FIA）：不同探针类型（酶标、荧光素标记）。

磁珠免疫分析技术（MBIA）：抗原/抗体分离、信号放大。

时间分辨荧光免疫测定（TRFIA）：最新进展。

4.其他免疫测定技术

流式细胞术（FCM）：

原理：荧光标记、液流、光学系统、信号采集与处理（设门技术）。

免疫荧光分选（FACS）：原理与应用。

细胞表面标志物检测：原理、常用标记物及意义（如淋巴细胞亚群分析、活化标记）。

细胞内细胞因子检测：穿孔法、酸性固定法/甲醇固定法的原理比较。

细胞凋亡检测：AnnexinV/PI法、TUNEL法原理。

临床免疫细胞分析要点：门策略设置、正常参考范围、分析判读、常见疾病细胞表型特征（感染、肿瘤、