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分子生物学与基因工程课程实验思考题试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

1.名词解释：载体

2.名词解释：转化

3.名词解释：Southernblot

4.名词解释：探针

5.名词解释：感受态细胞

6.简述PCR反应体系的5种核心组分及其作用。

7.质粒提取实验中“溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ”的作用及加入顺序。

8.限制性内切酶酶切反应中，影响酶切效率的因素有哪些？

9.如何通过蓝白斑筛选法筛选重组质粒？说明原理。

10.简述SDS检测蛋白质的原理。

11.某研究团队需从大肠杆菌基因组DNA中扩增一段1.5kb的目的基因（已知部分序列），并克隆到pUC19载体（多克隆位点有EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点）中。请设计实验方案，包括：①引物设计要点；②重组质粒的构建流程；③如何验证重组质粒构建成功？（至少2种方法）。

12.在进行PCR扩增时，出现以下结果：①无扩增产物；②非特异性条带（多条带）；③产物大小与预期不符。请分别分析可能原因及解决措施。

试卷答案

1.答案：载体是能够携带外源DNA进入宿主细胞并使其复制和表达的DNA分子，常用于基因工程。

解析思路：载体定义需强调其功能：携带外源DNA、自我复制、表达。核心是基因工程工具，用于导入目的基因。

2.答案：转化是将外源DNA导入宿主