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细胞生物学研究方法：显微成像技术及其应用.pdf

细胞生物学研究方法章节提要

显微成像包括直接成像和间接成像。显微技术是细胞生物学最基本的研究技术，包括光

学显微技术和电子显微技术。但不论何种显微镜，镜像的形需要3个基本要素：照明系

统、被观察的样品、聚焦和成像的透镜系统。当样品被放在光或的通路中，光束或电

子束被改变的特性能够用肉眼观察或被显像板记录下来；照明系统的波长决定能被检验

样品的最小极限，波长越长，波幅的跨度就越大，所能观察到的物体极限就越大；光和电子

都具有波的行为，样品的镜像是通过波的衍射而形成的。但凡透镜都有两个共同点，焦距和

角孔径。焦距是透镜平面到焦点的距离，角孔径是光样品进入显微镜的物镜镜口角。对

透镜最重要的是分辨率，是指能分辨出的相邻两个物点间最小距离的能力，称为分辨距离，

分辨距离越小，分辨率越大。要提高分辨率，可增大角孔径、增大介质折射率、缩短波长

等。但分辨率也受一些因素的影响，例如最高分辨极限受可见光波长的限制，0.2μm是分

辨极限。

几种常用的光学显微镜包括普通双筒显微镜；荧光显微镜，以紫外线为光源照射被检验

物体，使之发出荧光，观察其位置；相差显微镜，用于观察未染色的样品，利用光的波动性