高考生物一轮复习：基因工程的基本操作程序引物的设计.pptxVIP

基因工程专题——引物的设计

1.知识回顾【资料1】纳米抗体是一种单链抗体，通常由单一的抗原结合域组成。相对于传统的抗体具有以下显著优势：1.小巧而精确，更容易地渗透到组织和细胞内部2.高亲和力，可以更牢固地与靶标结合，提高了检测的灵敏度和效果。3.稳定性，纳米抗体能够耐受高温和极端pH环境。4.易于工程化，纳米抗体的单一结构使其更容易进行工程化。问题1：通过基因工程，利用大肠杆菌生产纳米抗体分为几步骤？1.目的基因的筛选与获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定

1.知识回顾问题2:获取目的基因最常见的方法是？其中最关键的环节是？利用PCR技术扩增，可获得大量目的基因。PCR技术中，最关键的步骤是引物的设计，只有引物合适且具有一定的特异性，才能扩增获得目的基因。问题3:设计引物时，应注意哪些要点？这些引物的设计是否合理？引物1：GCGGCCAAGTCGGATTCGG引物2：ATTCAAGCGATGCTAAGTG

1.知识回顾②引物内GC含量不宜过高，导致复性温度过高，同一反应的一对引物（A+T）/（G+C）值接近（两引物复性温差不宜过大）；③避免引物内部、引物之间4个碱基以上的互补；④对引物的修饰发生在端。（子链的延伸发生在引物的端）3’5’①长度通常为20-30bp，引物过短导致引物特异性较低，过长影响引物与模版的结