医院药剂考试高效液相色谱法（HPLC）操作题库及答案.docVIP

医院药剂考试高效液相色谱法（HPLC）操作题库及答案

考试时间：60分钟，满分：100分

一、操作题（每题20分，共100分）

1.配制反相HPLC分析流动相

-题目：请配制1000mL乙腈-水（80:20，v/v）的反相HPLC分析流动相，并说明操作步骤。

-答案：

1.准确量取800mL乙腈和200mL去离子水，分别置于1000mL容量瓶中。

2.将乙腈和去离子水缓慢加入容量瓶中，边加边轻轻摇动，避免产生气泡。

3.用去离子水润洗量筒三次，并将洗涤液也转移到容量瓶中。

4.加去离子水至容量瓶刻度线，盖紧瓶盖，充分混匀。

5.将配好的流动相过0.45μm滤膜，存于棕色瓶中备用。

2.HPLC系统调试

-题目：请调试一台配备C18色谱柱的HPLC系统，用于分析混合样品中的有机酸。

-答案：

1.检查HPLC系统各部件是否连接正确，包括泵、检测器、馏分收集器等。

2.将流动相装入泵中，检查流速是否稳定，一般为1.0mL/min。

3.打开检测器，设定波长为210nm，调节基线至平稳。

4.连接色谱柱，柱温设定为25℃，平衡流动相10-15分钟。

5.进行标准品测试，以确认系统调试成功，峰形良好，分离度符合要求。

3.样品前处理及HPLC分析

-题目：请对一份含有咖啡因和茶碱的混合样品进行前处理，并使用HPLC进行分析。

-答案：

1.样品前处理：

a.取样：准确称取0.5g样品置于5