项目6-1-2 细菌的革兰氏染色.pptxVIP

技能训练二细菌的革兰氏染色;一、实验目的

1.复习细菌的涂片技术；

2.再次巩固油镜的使用技术；

3.了解革兰氏染色的原理；

4.掌握革兰氏染色的方法；

5.能够正确鉴别细菌的革兰氏染色反应。

;二、实训材料和用具

1.菌种培养12～24小时的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草杆菌。

2.器材革兰氏染色液（结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%酒精、番红）、载玻片、吸水纸、接种环、显微镜、香柏油、二甲苯、酒精灯、蒸馏水、擦镜纸等。;革兰氏染色法(Giamstaining)由丹麦医生GhristianGram于1884年创立。

通过革兰氏染色法可将所有细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。它是鉴别细菌的重要方法。

ProceduresofGramStaining

;革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌

细胞壁的化学组成和结构不同;四、实验步骤;1.涂片：取干净载玻片一块，在载玻片中央加一滴蒸馏水，按无菌操作法取少许菌种涂片，涂成一均匀薄膜，注意取菌不要太多。

2.干燥：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。

3.固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定（以不烫手为宜）。;4.革兰氏染色

（1）结晶紫初染：待涂片冷却后染色，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1min；然后倾去染色液，水洗；

（2）碘液媒染：卢戈氏碘液媒染1min；用水洗去碘